[發明專利]耐久腸球菌及其產生的可抑制李斯特菌的細菌素

有效

• 申請號: 201310265229.3
• 申請日: 2013-06-27
• 公開（公告）號: CN103305445A
• 公開（公告）日: 2013-09-18
• 發明（設計）人: 都立輝;鞠興榮;袁建;何榮;王立峰;宋偉;劉琴
• 申請（專利權）人: 南京財經大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C07K14/315;C12P21/02;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/18;C12R1/46
• 代理公司: 南京匯盛專利商標事務所(普通合伙) 32238
• 代理人: 張立榮

1.耐久腸球菌（Enterococcus?durans）NJ株，其保藏登記號為：CGMCC?No.7236。

2.一種權利要求1所述耐久腸球菌（Enterococcus?durans）NJ株產生的可抑制李斯特菌的細菌素。

3.根據權利要求2所述細菌素，其特征在于：所述細菌素的分子量為4900-5000?Da。

4.一種權利要求2或3所述細菌素的制備方法，其特征在于：發酵培養耐久腸球菌（Enterococcus?durans）NJ株，獲得發酵液，純化后得到所述細菌素。

5.根據權利要求4所述細菌素的制備方法，其特征在于：所述耐久腸球菌（Enterococcus?durans）NJ株的發酵培養基含有：2-25?g/L碳源，15-20?g/L氮源，5-20?g/L無機鹽，pH?5-8。

6.根據權利要求5所述細菌素的制備方法，其特征在于：所述發酵培養基還含有0.8-1.5mL?/L表面活性劑；所述發酵培養基還含有0.1-3?g/L維生素。

7.根據權利要求6所述細菌素的制備方法，其特征在于：所述碳源為葡萄糖、乳糖、干酪乳清和糖蜜中的一種或兩種以上；所述氮源為蛋白胨、牛肉膏粉、酵母浸粉、酪蛋白胨、大豆蛋白胨中的一種或兩種以上，所述無機鹽為磷酸氫二鉀、乙酸鈉、檸檬酸氫二銨、檸檬酸三銨、硫酸鎂、硫酸錳、氯化鈉、β-甘油磷酸鈉中的一種或兩種以上，所述表面活性劑為吐溫-80、吐溫-20中的一種或兩種以上；所述維生素為維生素C、維生素D中的一種或兩種以上。

8.根據權利要求7所述細菌素的制備方法，其特征在于：所述發酵培養基含有：18.0?g/L葡萄糖，9.0?g/L蛋白胨，6.0?g/L牛肉膏粉，4.5?g/L酵母浸粉，1.0?mL/L吐溫-80，2.0?g/L磷酸氫二鉀，5.0?g/L乙酸鈉，2.0?g/L檸檬酸三銨，0.2?g/L硫酸鎂，0.06?g/L硫酸錳，pH值為6.5。

9.根據權利要求8所述細菌素的制備方法，其特征在于：所述耐久腸球菌（Enterococcus?durans）NJ株的發酵培養方法為：將耐久腸球菌（Enterococcus?durans）NJ株接種至所述發酵培養基，在36-39℃條件下發酵培養16-36?h，得到發酵液。

10.根據權利要求9所述細菌素的制備方法，其特征在于：所述發酵液的純化方法為：

（1）將發酵液離心取上清，用大孔吸附樹脂吸附，收集吸附后的大孔吸附樹脂，解吸附后得到細菌素粗品；

（2）將所述細菌素粗品用截留分子量為10000-8000Da超濾膜或超濾管進行超濾，取透過液；將所述透過液用截留分子量為1000-3000Da的透析袋或超濾膜分離，取保留液或截留液，即得所述細菌素。