[發明專利]一種注射用透明質酸-膠原蛋白復合水凝膠及其制備方法

無效

• 申請號: 201310264062.9
• 申請日: 2013-06-28
• 公開（公告）號: CN103333349A
• 公開（公告）日: 2013-10-02
• 發明（設計）人: 范代娣;馬曉軒;張婧婧
• 申請（專利權）人: 陜西巨子生物技術有限公司
• 主分類號: C08J3/075
• 分類號: C08J3/075;C08J3/24;C08L5/08;C08L89/00;A61K47/36;A61L27/20;A61L27/52
• 代理公司: 西安新思維專利商標事務所有限公司 61114
• 代理人: 李罡

技術領域

????本發明涉及一種水凝膠，具體涉及一種注射用透明質酸-膠原蛋白復合水凝膠及其制備方法。?

背景技術

透明質酸是一種酸性粘多糖，又稱糖醛酸、玻尿酸，是由兩個雙糖單位D-葡萄糖醛酸及N-乙酰葡糖胺組成的天然高分子聚合物。它的分子可攜帶500倍以上的水分，是一種效果優良的保濕成分，被稱為理想的天然保濕因子。透明質酸、其鹽類以及衍生物具有良好的生物可吸收性、生物相容性、粘彈性和保水性，因此被廣泛應用于美容、醫藥等領域。臨床上，透明質酸可用于眼科手術、外科手術中預防術后粘連、促進傷口的愈合和美容整形等方面，把一些藥物結合到透明質酸上形成的化合物還可以發揮藥物控制緩釋的作用，從而達到藥物定時和定點釋放的目的，但由于透明質酸存在降解速度快、機械強度較低等缺陷，而限制了其應用范圍，因此在實際應用中，經常通過交聯改性等方法使透明質酸分子內或分子間發生交聯制備成為透明質酸水凝膠，從而延長其在生物體內的作用時間。?

關于透明質酸交聯水凝膠的制備已有專利報道。專利CN?101538377?A公開了一種交聯透明質酸凝膠的制備方法。該發明中，采用1，4-丁二醇二縮水甘油醚作為交聯劑在堿性條件下與透明質酸中的羥基發生反應，再用生理平衡液清洗除去未反應的交聯劑從而制備得到產品。但在反應過程中，有的丁二醇二縮水甘油醚只有一個環氧基團參與了反應，這些交聯劑無法通過清洗除去，因此還會存在殘留毒性的問題。?

專利CN?101724164?B公開了一種制造交聯透明質酸的方法。該方法中，使透明質酸溶液在10-30℃下進行交聯反應超過48h。此低反應溫度下進行的交聯反應，所形成的交聯透明質酸不會因堿的水解作用而快速劣化，在使交聯劑消耗至合理的含量后即終止反應。方法中未除去殘留的BDDE，會存在安全隱患。?

膠原蛋白是一種高分子蛋白，一般呈白色、不透明的纖維狀。它是人體組成結構的主要成分之一，也是延緩人體衰老所必須的物質，廣泛地分布于人體的皮膚、骨骼、軟骨、肌肉、關節和頭發組織內，能夠起到支撐器官、保護肌體和修復的功能。類人膠原蛋白是將人體膠原蛋白的mRNA逆轉錄成cDNA，經酶切后的一段基因重組于E.coli（大腸桿菌）內，經過高密度發酵、分離、復性、純化工藝生產的一種高分子生物蛋白。它具有良好的生物吸收性、細胞粘附性和生物相容性，并且可明顯促進細胞生長，因此非常適合應用于醫學、整形等方面。?

環氧化合物類作為交聯劑被普遍應用于透明質酸凝膠的制備。它可以與透明質酸分子中的羥基和羧基發生反應形成醚鍵和酯鍵，本發明在反應體系中混合入膠原蛋白后，環氧化合物也可以與膠原蛋白中的羥基和羧基反應，并且也可以與其中的氨基反應形成仲氨基團，因此，使得環氧化合物反應更徹底，所形成的三維結構更加致密，可以有效的提升產物水凝膠的機械性能。?

發明內容

本發明的目的是提供一種使用更安全、緩釋作用更好的注射用透明質酸-膠原蛋白復合水凝膠及其制備方法。?

本發明所采用的技術方案是：?

一種注射用透明質酸-膠原蛋白復合水凝膠的制備方法，其特征在于：

由以下步驟實現：

步驟一：將透明質酸鈉溶解于堿性溶液中，攪拌使其完全溶解，使混合溶液中透明質酸的質量濃度為6%-20%；

步驟二：加入膠原蛋白，使混合溶液中膠原蛋白的質量濃度為1-6%，攪拌均勻；

步驟三：加入交聯劑，使混合溶液中交聯劑的質量濃度為1-10%，反應溫度30-60℃，反應時間1-14小時；

步驟四：除去殘留交聯劑；

步驟五：得到的產物在生理鹽水中平衡3-6小時；

步驟六：離心除去生理鹽水，所得產物進行粉碎形成顆粒。

步驟一中，透明質酸鈉的分子量為50-300萬。?

步驟一中，堿性溶液選自氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉溶液，摩爾體積分數為0.02-2?mol/L。?

步驟二中，膠原蛋白選自從動物組織提取的全長膠原蛋白、膠原蛋白多肽、明膠；或采用基因工程方法生產的重組膠原蛋白、類人膠原蛋白。?

步驟三中，交聯劑選自乙二醇二縮水甘油醚、1，4-丁二醇二縮水甘油醚、二甘醇二縮水甘油醚、聚乙二醇二縮水甘油醚、聚丙二醇二縮水甘油醚、1，6-己二醇二縮水甘油醚、1，2，7，8-二環氧辛烷、二乙烯基砜。?

步驟四中，除去殘留交聯劑的方法選自水洗、有機溶劑清洗、高溫高壓蒸餾。?

步驟六中，粉碎處理選自擠壓、研磨、切割方式。?