[發明專利]一種快速低成本純化CYP119酶的方法有效
| 申請號： | 201310264044.0 | 申請日： | 2013-06-28 |
| 公開（公告）號： | CN103305482A | 公開（公告）日： | 2013-09-18 |
| 發明（設計）人： | 蔣華麟;張為波;陳萍華;羅勝聯;羅旭彪 | 申請（專利權）人： | 南昌航空大學 |
| 主分類號： | C12N9/02 | 分類號： | C12N9/02 |
| 代理公司： | 南昌洪達專利事務所 36111 | 代理人： | 劉凌峰 |
| 地址： | 330000 江西省*** | 國省代碼： | 江西;36 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 快速 低成本 純化 cyp119 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種快速低成本純化CYP119酶的方法，其特征在于：
（1）將含有CYP119酶的菌體裂解液，在60℃加熱1小時，離心去除沉淀，收集上清；
（2）在0.5小時內逐漸向由（1）所得上清中加入(NH4)2SO4固體，至(NH4)2SO4最終質量百分比濃度為40%，離心去除沉淀，收集上清；
（3）在0.5小時?內逐漸向由（2）所得上清中加入(NH4)2SO4固體，至(NH4)2SO4最終質量百分比濃度為60%，離心去除上清，收集沉淀；
（4）將由（3）所得沉淀用10?mM?KH2PO4緩沖溶液（pH=2）在4℃緩慢攪拌溶解，即得到CYTP119酶的溶液。
2.一種權利要求1所述快速低成本純化CYP119酶的方法，其特征在于只利用加熱沉淀和鹽析的方法進行，不使用任何親和樹脂。
3.一種權利要求1所述快速低成本純化CYP119酶的方法，其特征在于可應用于快速且成本低廉地大規模提純CYP119酶。
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