[發明專利]人白細胞介素35酶聯免疫吸附測定試劑盒及其制備方法

有效

• 申請號: 201310263621.4
• 申請日: 2013-06-28
• 公開（公告）號: CN103353533A
• 公開（公告）日: 2013-10-16
• 發明（設計）人: 何峰容;楊娟;汪景;彭夫望;孫穎;高強;李慶;姚雯
• 申請（專利權）人: 武漢優爾生科技股份有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/577;G01N33/544
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種人白細胞介素35酶聯免疫吸附測定試劑盒，其特征在于所述的試劑盒包括小鼠抗IL-12p35單克隆抗體(包被抗體)、全長重組蛋白IL-35(標準品)、生物素化的小鼠抗IL-27EBI3單克隆抗體(檢測液A)、底物TMB和終止液。

2.根據權利要求1所述的試劑盒，所述的試劑盒以聚苯乙烯試劑板(PS)作為固相載體，該固定相表面依次有包被層和封閉層，其中包被層中包括小鼠抗IL-12p35單克隆抗體，封閉層包括牛血清蛋白；試劑盒中還包括重組的全長IL-35蛋白、含有生物素化的小鼠抗IL-27EBI3單克隆抗體檢測液A以及含有親和素化辣根過氧化物酶(HRP)作為檢測液B。

3.根據權利要求1所述試劑盒的制備方法，所述的試劑盒通過包括如下步驟在內的方法所制備而成：

使用96孔聚苯乙烯試劑板(PS)作為固相載體，先將其置于紫外光下輻照2小時，使PS板活化；

在試劑板微孔條上預先包被一定濃度的小鼠抗IL-12p35單克隆抗體(此抗體是通過制備的重組蛋白IL12p35免疫小鼠篩選單抗而獲得)，4℃過夜，經洗板及牛血清白蛋白封閉處理后制成包被好的酶標板；

利用重疊PCR制備全長IL35蛋白作為試劑盒的標準品；

配制以生物素化的小鼠抗IL-27EBI3單克隆抗體(此抗體是通過制備的重組蛋白IL27EBI3免疫小鼠篩選單抗而獲得)為活性成分的檢測液A；

配制以親和素化辣根過氧化物酶HRP作為檢測液B。