[發明專利]一種熒光標記的腫瘤靶向示蹤劑及制備方法和應用無效
| 申請號: | 201310254778.0 | 申請日: | 2013-06-25 |
| 公開(公告)號: | CN103623418A | 公開(公告)日: | 2014-03-12 |
| 發明(設計)人: | 蔣孟軍;吳鵬西;殷瑩;李小雯;謝平 | 申請(專利權)人: | 蔣孟軍;吳鵬西;殷瑩;李小雯;謝平 |
| 主分類號: | A61K47/42 | 分類號: | A61K47/42;A61K49/00 |
| 代理公司: | 無錫市大為專利商標事務所 32104 | 代理人: | 時旭丹;劉品超 |
| 地址: | 214023 江蘇省無錫*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 熒光 標記 腫瘤 靶向 示蹤劑 制備 方法 應用 | ||
1.一種熒光標記的腫瘤靶向示蹤劑,其特征在于該示蹤劑由異硫氰酸熒光素FITC與7肽IF7構成,記為FITC-?IF7;7肽IF7為異亮氨酸-苯丙氨酸-亮氨酸-亮氨酸-色氨酸-谷氨酰胺-精氨酸。
2.權利要求1所述熒光標記的腫瘤靶向示蹤劑的制備方法,其特征在于:
(1)IF7、FITC分別用DMSO溶解配制成10mg/mL溶液,再用0.5mol/L?的碳酸氫鈉緩沖溶液稀釋成1mg/mL溶液;
(2)取1mg/mL?的FITC溶液10μL緩慢加入于1mg/mL?的IF7?100μL溶液中,邊加邊輕輕晃動使其混合均勻,暗處4℃反應24?h;
(3)加入5mol/L的NH4Cl至終濃度50mmol/L,4℃終止反應2?h。
3.權利要求1所述的腫瘤靶向示蹤劑的分離純化方法,其特征在于:
(1)制備型高效液相HPLC純化
FITC標記的IF7用制備型高效液相HPLC純化,Waters?XBridge,C-18色譜柱150?mm?×19mm,5μm,流動相A為含0.1%TFA的純水,B為含0.1%TFA的乙腈,流速20mL/min,進樣體積為1?mL,檢測波長218nm;
(2)梯度洗脫,0?-1.2min:95%A和5%?B;1.2-21?min:95%A和5%?B-35%A和65%?B;21-24?min:35%A和65%?B;24-27?min:35%A和65%?B-5%A和95%?B;27-30min:5%A和95%?B-95%A和5%?B;收集16.51min的流出液。
4.權利要求1所述的腫瘤靶向示蹤劑的應用,其特征在于應用于腫瘤細胞的示蹤,用熒光顯微鏡和/或流式細胞儀技術觀察示蹤劑對腫瘤細胞的親和力。
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