[發(fā)明專利]含酚羥基的環(huán)境激素類化合物的表面增強(qiáng)拉曼檢測(cè)方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310254221.7
• 申請(qǐng)日: 2013-06-24
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103411944A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-11-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 韓曉霞;曲桂玉;王旭;宋薇;阮偉東;趙冰
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 吉林大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N21/65
• 分類號(hào): G01N21/65
• 代理公司: 長(zhǎng)春吉大專利代理有限責(zé)任公司 22201
• 代理人: 張景林;王恩遠(yuǎn)

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于環(huán)境激素類化合物檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種應(yīng)用散射表面增強(qiáng)拉曼技術(shù)快速定性和痕量檢測(cè)含酚羥基的環(huán)境激素類化合物的方法。

背景技術(shù)

環(huán)境激素，即環(huán)境荷爾蒙物質(zhì)，又被稱為“環(huán)境內(nèi)分泌干擾物質(zhì)”、“類激素物質(zhì)”等。國(guó)際化學(xué)品安全規(guī)劃小組為其定義：環(huán)境內(nèi)分泌干擾物是指能夠改變內(nèi)分泌系統(tǒng)的功能并且對(duì)健康生物體或其后裔或亞群體產(chǎn)生有害影響的外源性物質(zhì)。隨著工業(yè)的發(fā)展，大量環(huán)境激素在制藥、塑料制品添加劑生產(chǎn)、除草劑的使用和垃圾處理等過(guò)程中不斷釋放，對(duì)生態(tài)環(huán)境造成了巨大危害。

目前我國(guó)對(duì)這些環(huán)境激素普遍的檢測(cè)方法主要是液相萃取和固相萃取高效液相色譜-質(zhì)譜學(xué)法，該方法對(duì)痕量、超痕量環(huán)境激素的分析具有獨(dú)特的專一性和較高的靈敏度。但是，色譜-質(zhì)譜學(xué)方法需要有復(fù)雜的樣品前處理過(guò)程，耗時(shí)長(zhǎng)；要求具有良好的實(shí)驗(yàn)環(huán)境和訓(xùn)練有素的操作人員；以及昂貴的實(shí)驗(yàn)儀器、大量的色譜純?nèi)軇┖投ㄐ远坑玫臉?biāo)準(zhǔn)品，這些都給該方法的普遍應(yīng)用帶來(lái)了困難。

表面增強(qiáng)拉曼散射（SERS）技術(shù)廣泛應(yīng)用于化學(xué)、生物分子的痕量檢測(cè)，具有檢測(cè)時(shí)間短、原位檢測(cè)、實(shí)時(shí)檢測(cè)、無(wú)損分析和靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)。但是該方法需要以高靈敏度的SERS基底作為基礎(chǔ)，并且需要待測(cè)物與增強(qiáng)基底有較強(qiáng)的物理或化學(xué)吸附作用。含酚羥基的環(huán)境激素類化合物大多都不溶于水，并且通常很難與SERS基底有相互作用，因此限制了SERS檢測(cè)技術(shù)在此類化合物上的應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種通過(guò)生成偶氮分子且利用表面增強(qiáng)拉曼技術(shù)對(duì)含酚羥基的環(huán)境激素類化合物進(jìn)行定性及定量檢測(cè)的方法，該方法不但提高了對(duì)這些污染物的檢測(cè)靈敏度，而且克服了傳統(tǒng)檢測(cè)方法前處理復(fù)雜、耗時(shí)長(zhǎng)等局限性。

本發(fā)明通過(guò)生成偶氮分子的方法，對(duì)待測(cè)分子（含酚羥基的環(huán)境激素類化合物）進(jìn)行改性，使其帶上容易與SERS基底作用的N=N鍵，從而通過(guò)間接的方法對(duì)這些分子實(shí)現(xiàn)定性及痕量定量檢測(cè)。該方法所用的合成方法簡(jiǎn)單，快速；并且對(duì)含酚羥基的激素類化合物的檢測(cè)方便，快捷，靈敏度較高，在含酚羥基的激素類化合物的檢測(cè)中具有很大的應(yīng)用前景，可為環(huán)境激素污染的檢測(cè)提供一種新的檢測(cè)手段。

一種通過(guò)生成偶氮分子且利用表面增強(qiáng)拉曼技術(shù)對(duì)含羥基的環(huán)境激素類化合物進(jìn)行定性定量和痕量檢測(cè)的方法，其步驟如下：

（1）將待檢測(cè)的含酚羥基的環(huán)境激素類化合物溶于有機(jī)溶劑，制成待測(cè)溶液；

（2）將對(duì)氨基苯磺酸制成重氮鹽正離子溶液；

（3）制備銀溶膠的蒸餾水溶液；

（4）將步驟（1）配制的待測(cè)溶液和步驟（2）的溶液混合，反應(yīng)生成環(huán)境激素類化合物的偶氮衍生物；

（5）將步驟（3）的溶液與步驟（4）的溶液等體積混合，取混合溶液進(jìn)行表面增強(qiáng)拉曼檢測(cè)，從而得到待檢測(cè)的含羥基的環(huán)境激素類化合物的表面增強(qiáng)拉曼圖譜；將圖譜中兩個(gè)固定特征峰的強(qiáng)度的比值與“待測(cè)分子濃度-拉曼光譜特征峰強(qiáng)度”標(biāo)準(zhǔn)曲線比對(duì)，得到環(huán)境激素類化合物的濃度，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)待測(cè)分子的定性定量和痕量檢測(cè)。

“待測(cè)分子濃度-拉曼光譜特征峰強(qiáng)度”標(biāo)準(zhǔn)曲線建立的步驟如下：

（1）將多組已知濃度的含酚羥基的環(huán)境激素類化合物溶于有機(jī)溶劑，制成待測(cè)溶液；

（2）將對(duì)氨基苯磺酸制成重氮鹽正離子溶液；

（3）制備銀溶膠的蒸餾水溶液；

（4）將步驟（1）配制的待測(cè)溶液和步驟（2）配制的溶液混合，制備得到含酚羥基的環(huán)境激素類化合物偶氮衍生物；

（5）將步驟（3）的溶液與步驟（4）的溶液等體積混合，然后進(jìn)行表面增強(qiáng)拉曼檢測(cè)，從而得到多組已知濃度的含酚羥基的環(huán)境激素類化合物偶氮衍生物的表面增強(qiáng)拉曼圖譜；以含酚羥基的環(huán)境激素類化合物濃度的對(duì)數(shù)和對(duì)應(yīng)圖譜中兩個(gè)固定特征峰的強(qiáng)度的比值建立曲線，即得到“待測(cè)分子濃度-拉曼光譜特征峰強(qiáng)度”標(biāo)準(zhǔn)曲線。

上述檢測(cè)方法中所述的步驟（1）中，含酚羥基的環(huán)境激素類化合物包括鄰位或?qū)ξ挥锌瘴坏沫h(huán)境激素類化合物，如雌酚酮、雌二醇、雌三醇、己雌酚、雙酚A、脫氫異雄酮等；有機(jī)溶劑包括甲醇、乙醇等；待測(cè)溶液的濃度為1×10^-3～1×10^-10mol/L；

上述檢測(cè)方法中所述的步驟（2）中，是在酸性條件下（pH值5～6）將對(duì)氨基苯磺酸溶液在劇烈攪拌下加入到亞硝酸鈉溶液中（對(duì)氨基苯磺酸和亞硝酸摩爾比約為1：1～1.5）；