[發明專利]一株耐熱氨肽酶的產生菌及該酶的純化方法

無效

• 申請號: 201310253385.8
• 申請日: 2013-06-25
• 公開（公告）號: CN103361287A
• 公開（公告）日: 2013-10-23
• 發明（設計）人: 田亞平;吳延濤;周楠迪
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N9/48;C12R1/385
• 代理公司: 無錫市大為專利商標事務所 32104
• 代理人: 時旭丹;劉品超

1.一株耐熱氨肽酶產生菌，其被鑒定分類命名為銅綠假單胞桿菌（Pseudomonas?aeruginosa?）NJ-814，已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號：CGMCC?No.7638。

2.一種用權利要求1所述菌株制備耐熱氨肽酶的純化方法，其特征在于出發菌株為銅綠假單胞桿菌（Pseudomonas?aeruginosa）NJ-814，即CGMCC?NO.7638，經過搖瓶發酵，離心獲得的粗酶液，通過硫酸銨鹽析和DEAE陰離子交換層析分離純化，經SDS-PAGE檢測獲得電泳純的耐熱氨肽酶；

純化所得到的耐熱氨肽酶，其最適反應溫度為80℃；在50℃或60℃保溫120?min后，相對酶活仍高于80％；在70℃保溫120?min相對酶活保留70％；在80℃處理120?min的相對酶活仍保留49.78%，即此溫度下半衰期為119?min；最適反應pH為9.0；pH穩定范圍為7.5-10.5；對Lys-pNA、Arg-pNA、Leu-pNA作為底物均有一定的分解作用，其中對Lys-pNA的分解能力強。