[發明專利]桑黃菌絲體活性多糖的制備方法

有效

• 申請號: 201310247203.6
• 申請日: 2013-06-21
• 公開（公告）號: CN103319618A
• 公開（公告）日: 2013-09-25
• 發明（設計）人: 楊焱;李婷婷;周峰;唐傳紅;張勁松;劉艷芳;邵倩;李正鵬;周帥
• 申請（專利權）人: 上海市農業科學院
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61P37/04;A01G1/04
• 代理公司: 暫無信息
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技術領域

本發明涉及食用菌培養及加工領域，具體的涉及一種桑黃菌絲體活性多糖的制備方法。

背景技術

鮑氏針層孔菌(Phellinus?baumii?Pilat)，俗稱桑黃，是一種多年生、黃褐色的珍貴的藥用真菌，有“森林黃金”之美稱。因其抗腫瘤效果顯著，已經成為國內外研究的熱點，風靡于日本及韓國，暢銷不衰。

作為珍稀藥用真菌，桑黃的主要活性成分是多糖，目前對桑黃的研究較多集中在多糖提取及其抗癌效果研究。大量實驗表明，桑黃菌絲體和子實體提取物具有的良好抗腫瘤效果。由于桑黃子實體生長周期比較長，價格昂貴稀少，而菌絲體生長周期短，因此從桑黃菌絲體中提取活性物質是很好的發展方向。提取桑黃活性多糖，需要富集大量的菌絲體；液體發酵需要發酵罐，動力成本較大，技術相對復雜；而固體發酵相對簡便易行，基質可采用能食用的農副產物，可進行綜合利用。

然而，現有的桑黃的培養成本高，活性多糖的純度低，影響了其在藥學上的進一步應用。

發明內容

本發明的目的是提供一種桑黃菌絲體活性多糖的制備方法，為了實現本發明的目的，擬采用如下技術方案：

本發明一方面涉及一種桑黃菌絲體活性多糖的制備方法，所述的方法包括如下步驟：

(1)培養菌絲體：將桑黃菌種長于PDA斜面上，生長周期為一周即為桑黃母種；取混合好的木屑培養基高壓滅菌，冷卻后接桑黃母種于培養基上，27-29℃于恒溫培養箱避光培養8-12天即得到桑黃原種；將原種翻接到木屑培養基中，27-29℃于菇房避光培養12-18天擴大培養；將擴大培養的原種接種于木屑培養基上，置于27-29℃菇房中培養，生長周期25-30天；所述的木屑培養基包括50-70重量份木屑、15-25重量份麩皮、0.5-1.5重量份石膏以及適量水；

(3)菌絲體多糖的提取

除去菌袋，將培養好的菌絲體連同培養料一起搗碎，加蒸餾水沸水浴提取1-3h，濾渣重復提取1-3次，合并提取液，在旋轉蒸發儀上減壓濃縮至物料比1∶8-12；取濃縮液，8000-12000×g離心20-40min去除不溶性雜質，加乙醇沉淀20h以上，分離沉淀，使用與醇沉濃度相同的酒精對沉淀進行洗滌，然后使用水溶解，用3200-3800分子量透析袋透析2-4d，去除小分子物質，冷凍干燥桑黃菌絲體粗多糖，任選地，還包括對桑黃菌絲體粗多糖進行進一步純化的步驟。

在本發明的一個優選實施方式種，所述的乙醇沉淀時的濃度為30％-80％，優選的，為60-80％。

在本發明的另一個優選實施方式種，所述冷凍干燥的桑黃菌絲體粗多糖的含量在30％以上，優選在33％以上。

在本發明的另一個優選實施方式種，所述的桑黃菌絲體粗多糖包括巖藻糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖和甘露糖。

本發明另一方面還涉及采用上述方法所制備得到的桑黃菌絲體粗多糖。

在本發明的另一方面，還涉及上述桑黃菌絲體粗多糖的應用，所述的桑黃菌絲體粗多糖用于提高人或動物體的免疫力。

本發明的方法一方面利用木屑和麩皮這些廉價的基質進行固態發酵，成本低，技術簡單，一般農戶即可進行，易于推廣；另一方面，采用本發明的方法能夠有效的提高桑黃菌絲體粗多糖的純度，所獲得的桑黃菌絲體粗多糖具有很好的免疫活性。

具體實施方式

實施例1

(1)配制袋料培養基

配置59％木屑、20％麩皮、1％石膏，用水拌合，保持含水量在65％左右。使用聚丙烯袋子(17cm×33cm×0.0005cm)裝料，每袋裝木屑培養基濕料1kg，121℃高壓滅菌120min。

(2)母種、原種、栽培種及菌絲體的培養

將桑黃菌種長于PDA斜面上，生長周期為一周即為桑黃母種。

取混合好的木屑培養基裝500ml的錐形瓶至二分之一，大約制作5瓶(1瓶母種可以制作16袋原種)，高壓滅菌120min，冷卻后接桑黃母種于培養基上，28℃于恒溫培養箱避光培養10天即得到桑黃原種。

將5瓶原種翻接到袋料培養基中，28℃于菇房避光培養15天擴大培養得到80袋栽培種。取上述桑黃菌栽培種接種于實施例1的袋料培養基上，置于28℃菇房中培養，生長周期25-30天。

(3)菌絲體多糖的提取及總糖含量的測定