[發明專利]大腸桿菌混合溶組織內阿米巴在制備治療肝癌實體瘤藥物中的應用

有效

• 申請號: 201310245877.2
• 申請日: 2013-06-20
• 公開（公告）號: CN103301163A
• 公開（公告）日: 2013-09-18
• 發明（設計）人: 徐慶;程訓佳;何松青;梁榮感;韋京辰;張均智;莫剛;楊成芳
• 申請（專利權）人: 桂林醫學院
• 主分類號: A61K35/74
• 分類號: A61K35/74;A61P35/00;A61K35/68
• 代理公司: 桂林市華杰專利商標事務所有限責任公司 45112
• 代理人: 巢雄輝

1.大腸桿菌混合溶組織內阿米巴在制備治療肝癌實體瘤藥物中的應用，其特征是：它是將終濃度為1×10⁶個/ml大腸桿菌與終濃度為1.0×10⁵/ml阿米巴滋養體混合，制成大腸桿菌+阿米巴滋養體細胞懸液制劑藥物，定向注射接種到肝癌實體瘤中，用于治療肝癌實體瘤。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征是：所述的大腸桿菌+阿米巴滋養體細胞懸液制劑采用下述方法制得：

（1）大腸桿菌培養：按常規方法培養大腸桿菌；

（2）溶組織內阿米巴培養：采用Robinson’s培養基按有菌培養方法培養，每隔2-3天轉種一次；取培養72小時生長至對數生長期的阿米巴培養管，冰浴5min，混勻，收集培養物；用200目篩網過濾，收集濾液，1500rpm離心5min，棄上清；取沉淀物上層，用NS清洗，1500rpm離心5min，洗滌兩次；取沉淀物用NS重懸，計數板計數，調整蟲數為1×10⁵/ml，用0.1%臺盼藍染色顯微鏡下計數鑒定其活度，保證阿米巴活蟲數達95%以上用于實驗；

（3）將阿米巴懸液1ml加入1×10⁶個/ml的大腸桿菌液1ml，1500rpm離心5min，去掉1ml上清液，混勻，即制得混合液里阿米巴終濃度為1.0×10⁵/ml，大腸桿菌終濃度為1×10⁶個/ml的大腸桿菌溶組織阿米巴滋養體懸液。