[發明專利]一種去甲木脂素類化合物及其從多枝霧水葛中分離鑒定的方法

有效

• 申請號: 201310241055.7
• 申請日: 2013-06-18
• 公開（公告）號: CN103333176A
• 公開（公告）日: 2013-10-02
• 發明（設計）人: 郭麗冰;劉旭陽;謝郁峰;陶曙紅
• 申請（專利權）人: 廣東藥學院
• 主分類號: C07D493/08
• 分類號: C07D493/08;A61P31/04;A61P35/00
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 任重

技術領域

本發明屬于天然產物活性成分提取領域，具體公開一種去甲木脂素類化合物及其從多枝霧水葛中分離和鑒定方法。

背景技術

多枝霧水葛Pouzolzia?zeylanica?(L.)?Benn.?Var.?microphylla?(Wedd.)W.T.Wang.又名石珠，石珠仔，生于潮濕的山地、溝邊和路旁或低山灌叢中或疏林中，主要分布于我國江西、福建、臺灣、廣東、廣西、云南等地，是霧水葛屬藥用植物中在中國分布較廣，使用較多的一種。其主要功效為解毒消腫，接骨，用于癰腫，梅毒，肺結核，骨折。有“啜膿膏”、“膿見消”、“拔膿草”等俗稱。

國內外對霧水葛屬植物的研究報道不多，主要是關于其抗菌、驅蟲、抗腫瘤和降血糖應用的零星報道。化學成分研究方面，國外文獻報道了霧水葛含有槲皮素（quercetin），牡荊素(vitexin)，異牡荊素（isovitexin），phylanthin?，甲基-硬脂酸酯(metyl-stearate)、β-胡蘿卜苷以及兩個去甲木脂素化合物，分別命名為pouzoligan?A和pouzoligan?B，其結構為2-羥基-4-[羥基苯基-（4-羥基-3-甲氧基芐基）]-3-（3,5-二羥基苯基）四氫呋喃和1,4-?二羥基-3-[4-羥基苯基-?(4-羥基-?3-甲氧基芐基)]?-2-?(3,5?–二羥基苯基)丁烷。國內僅見多枝霧水葛總黃酮、總生物堿提取工藝專利，未見其他關于多枝霧水葛木脂素類化合物的研究報道。

發明內容

本發明的目的在于提供一種由多枝霧水葛提取的新型去甲木脂素類化合物，其具有一定的抑菌和腫瘤抑制活性。

本發明的另一目在于提供由多枝霧水葛中分離出所述新型去甲木脂素類化合物的方法。

本發明同時還有一目的在于提供該新化合物的鑒定方法。

本發明的上述目的通過如下技術方案予以實現：

一種去甲木脂素類化合物，所述去甲木脂素類化合物具有如式（Ⅰ）所示結構：

（Ⅰ）。

式（Ⅰ）所示化合物的英文命名為：2,5-bis(4-methoxy-3-epoxylphenyl)-3,4-bis(3,5-dihydroxyphenyl)-tetrahydrofuran，其結構通過波譜解釋確定。

所述化合物從多枝霧水葛中分離的方法，包括如下步驟：

S1.將多枝霧水葛粉碎，加入乙醇，回流提取，合并提取液，濃縮成浸膏液，備用；

S2.將S1.得到的浸膏液依次采用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取，收集乙酸乙酯萃取液并濃縮，得到乙酸乙酯萃取物；

S3.將乙酸乙酯萃取物進行柱層析，以二氯甲烷和甲醇的混合液梯度洗脫，二氯甲烷與甲醇的體積比依次為：80:1，40:1，20:1，10:1，5:1，1:1，0:1；每500mL收集一份洗脫液，洗脫液經薄層色譜法檢識，主斑點顏色變淡即更換洗脫液的濃度，合并第60~80份流出液；

S4.對S3.所合并的流出液用尺寸為1cm×150cm的葡聚糖凝膠柱層析進行分離，以氯仿和甲醇體積比為1:1的混合液洗脫，5mL收集一份洗脫液，經薄層色譜法檢識顯色，收集第35~45份流出液，記為Fr.4；

S5.對S4.所得Fr.4進行柱層析，用氯仿和甲醇的混合液進行洗脫，經薄層色譜法檢識，合并顯色組分；

S6.對S5.所得顯色組分進行ODS柱層析，用30體積%的甲醇洗脫，洗脫液經薄層色譜法檢識，合并顯色組分，濃縮得到式（Ⅰ）所示化合物；

所述薄層色譜檢識以5%硫酸香草醛溶液作為顯色劑。

優選地，S1.中，所用乙醇為75%的乙醇水溶液。

優選地，S1中，所述提取的溫度在70℃以下進行。

優選地，S1.中，所用乙醇的用量為多支霧水葛的10~20倍。

優選地，S1.中，回流提取的次數為3次，每次2小時。

優選地，S5.為采用氯仿和甲醇體積比為13:1的混合溶液進行洗脫。

優選地，S5.為采用氯仿和甲醇體積比為13:1的混合溶液進行洗脫時，每50mL收集一份洗脫液，經薄層色譜法檢識，第6~10份顯色，收集該組分。

優選地，S6.中，每10mL收集一份洗脫液，經薄層色譜法檢識，第8~11份顯色，收集該組分。

優選地，S3.和S5.中所述柱層析為硅膠柱層析。?

優選地，S3.中的硅膠為100~200目；S5.中的硅膠為300~400目。