[發(fā)明專(zhuān)利]雜色曲霉來(lái)源的α-半乳糖苷酶Z-GALC及其編碼基因與應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310240573.7
• 申請(qǐng)日: 2013-06-18
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103320413A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-09-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 段文娟;謝寧;李學(xué)軍;崔勝男
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 天津博菲德科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12N9/40
• 分類(lèi)號(hào): C12N9/40;C12N15/56;C12N15/63;C12N5/10;C12N15/11;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12P19/14;C12P19/02
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種雜色曲霉來(lái)源的α-半乳糖苷酶Z-GALC及其編碼基因與應(yīng)用。

背景技術(shù)

α-半乳糖苷酶(alpha-galactosidase，EC3.2.1.22)，又稱(chēng)為蜜二糖酶，屬于外切糖苷酶類(lèi)，能專(zhuān)一性催化水解多糖、糖脂、糖蛋白中糖鏈末端的α-1，6半乳糖苷鍵，其不僅能水解棉籽糖、水蘇糖和毛蕊花糖等低聚糖，還能水解含α-半乳糖苷的雜多糖。α-半乳糖苷酶作為一種新型酶制劑，在飼料工業(yè)中得到了廣泛的應(yīng)用。

近年來(lái)的研究表明，α-半乳糖苷酶作為一種特異性外源酶，添加于含大豆粕的飼料中，可有效促進(jìn)餅粕類(lèi)飼料原料中α-半乳糖苷物質(zhì)的分解，提高飼料營(yíng)養(yǎng)素的利用率，消除由α-半乳糖苷類(lèi)物質(zhì)引起的抗?fàn)I養(yǎng)作用，為機(jī)體提供更多的能量，促進(jìn)腸道有益微生物的增殖。

目前，不斷提高菌種產(chǎn)酶水平，研究α-半乳糖苷酶合成的調(diào)控機(jī)制、酶基因的克隆和異源高效表達(dá)，進(jìn)行產(chǎn)業(yè)化推廣應(yīng)用是今后發(fā)展的主要方向。α-半乳糖苷酶主要是利用微生物發(fā)酵法生產(chǎn)的，菌種主要來(lái)源于曲霉和犁頭霉。雜色曲霉屬于子囊菌門(mén)，盤(pán)菌亞門(mén)，散囊菌目，發(fā)菌科，曲霉屬，目前還未見(jiàn)α-半乳糖苷酶基因的報(bào)道。克隆雜色曲霉的α-半乳糖苷酶基因及異源表達(dá)，具有α-半乳糖苷酶分類(lèi)學(xué)理論指導(dǎo)的意義，新基因的獲得也將對(duì)該基因在其他表達(dá)系統(tǒng)的高效表達(dá)建立研究基礎(chǔ)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種雜色曲霉來(lái)源的α-半乳糖苷酶Z-GALC及其編碼基因與應(yīng)用。

本發(fā)明所提供的蛋白Z-GALC，來(lái)自雜色曲霉（Aspergullus?versicolor），具有α-半乳糖苷酶活性，為如下（a）或（b）的蛋白質(zhì)：

（a）由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；

（b）將序列1的氨基酸序列經(jīng)過(guò)一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有幾丁質(zhì)酶功能的由序列表序列1衍生的蛋白質(zhì)。

為了使（a）或（b）中的蛋白Z-GALC便于純化，可在由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)的氨基末端或羧基末端連接上如表1所示的標(biāo)簽。

表1標(biāo)簽的序列

標(biāo)簽殘基數(shù)序列

Poly-Arg5-6（通常為5個(gè)）RRRRRPoly-His2-10（通常為6個(gè)）HHHHHHFLAG8DYKDDDDKStrep-tag?II8WSHPQFEKc-myc10EQKLISEEDL