[發明專利]雜色曲霉來源的α-半乳糖苷酶Z-GALC及其編碼基因與應用有效
| 申請號: | 201310240573.7 | 申請日: | 2013-06-18 |
| 公開(公告)號: | CN103320413A | 公開(公告)日: | 2013-09-25 |
| 發明(設計)人: | 段文娟;謝寧;李學軍;崔勝男 | 申請(專利權)人: | 天津博菲德科技有限公司 |
| 主分類號: | C12N9/40 | 分類號: | C12N9/40;C12N15/56;C12N15/63;C12N5/10;C12N15/11;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12P19/14;C12P19/02 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 雜色 曲霉 來源 半乳糖 galc 及其 編碼 基因 應用 | ||
1.一種蛋白質,是如下(a)或(b)的蛋白質:
(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質;
(b)將序列1的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有α-半乳糖苷酶活性的由序列表序列1衍生的蛋白質。
2.權利要求1所述蛋白的編碼基因。
3.根據權利要求2所述基因,其特征在于:所述基因為如下1)或2)或3)或4)的DNA分子:
1)序列表中序列2所示的DNA分子;
2)序列表中序列3所示的DNA分子;
3)在嚴格條件下與1)或2)限定的DNA序列雜交且編碼具有α-半乳糖苷酶活性的蛋白的DNA分子;
4)與1)或2)或3)限定的DNA序列具有90%以上同源性且編碼具有α-半乳糖苷酶活性的蛋白的DNA分子。
4.含有權利要求2或3所述基因的重組表達載體、表達盒、轉基因細胞系或重組菌。
5.根據權利要求4所述的重組表達載體,其特征在于:所述重組表達載體是將所述基因插入載體pET-28a(+)的多克隆位點得到的。
6.擴增權利要求2或3所述基因全長或其任意片段的引物對。
7.權利要求1所述蛋白在降解糖鏈末端具α-1,6半乳糖苷鍵的物質或制備α-半乳糖苷酶中的應用。
8.根據權利要求7所述的應用,其特征在于:所述糖鏈末端具α-1,6半乳糖苷鍵的物質為對硝基酚-α-D-吡喃半乳糖。
9.根據權利要求7或8所述的應用,其特征在于:所述降解的pH值為3.0—10.0,或4.0—9.0,或5.0—9.0,或5.0—6.0,或6.0—7.0,或7.0—8.0,或8.0—9.0。
10.根據權利要求7—9中任一所述的應用,其特征在于:所述降解的溫度為37—65℃,或37—60℃,或37—55℃,或37—50℃,或37—45℃,或37—42℃。
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