[發(fā)明專利]人自身免疫性疾病潰瘍性結腸炎診斷試劑盒及其制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310237858.5
• 申請日: 2013-06-17
• 公開（公告）號: CN103293301A
• 公開（公告）日: 2013-09-11
• 發(fā)明（設計）人: 楊武;尚建平;寧義剛
• 申請（專利權）人: 天津瑞華生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543
• 代理公司: 北京市盈科律師事務所 11344
• 代理人: 王柱

1.人自身免疫性疾病潰瘍性結腸炎診斷試劑盒，其特征是：所述的試劑盒包括：

待檢測血清標識物的標準品；

包被有標識物特異抗原系統(tǒng)的固相板；

聯(lián)接有辣根過氧化酶的標識物的抗體；

洗滌液；

辣根過氧化酶底物的溶液；

終止液。

2.根據(jù)權利要求1所述的人自身免疫性疾病潰瘍性結腸炎診斷試劑盒，其特征是：所述的標識物為抗人中性粒細胞抗原免疫球蛋白G。

3.根據(jù)權利要求2所述的人自身免疫性疾病潰瘍性結腸炎診斷試劑盒，其特征是：所述的聯(lián)接有辣根過氧化酶的標識物的抗體為抗非人類免疫球蛋白G抗體。

4.根據(jù)權利要求3所述的人自身免疫性疾病潰瘍性結腸炎診斷試劑盒，其特征是：所述的辣根過氧化酶底物的溶液包含A液和B液，其中A液為過氧化氫溶液，B液為四甲基聯(lián)苯胺溶液或者A液為四甲基聯(lián)苯胺，B液為醋酸鈉/枸櫞酸緩沖液。

5.根據(jù)權利要求3所述的人自身免疫性疾病潰瘍性結腸炎診斷試劑盒，其特征是：所述的辣根過氧化酶連接抗體的采用碘酸鈉法制備。

6.根據(jù)權利要求3所述的人自身免疫性疾病潰瘍性結腸炎診斷試劑盒，其特征是：所述的洗滌液為磷酸鹽緩沖液。

7.根據(jù)權利要求3所述的人自身免疫性疾病潰瘍性結腸炎診斷試劑盒，其特征是：所述的終止液為硫酸。

8.根據(jù)權利要求1-7任一項所述的人自身免疫性疾病潰瘍性結腸炎診斷試劑盒，其特征是：所述的待檢測血清標識物的標準品的制備方法為：由高效價抗人中性粒細胞的血清中制備免疫球蛋白G抗血清，提純IgG，經(jīng)QAE化學試劑處理血清并分離血清，將高效價的抗ANCA的免疫球蛋白G血清混合制備，滅活補體，再加穩(wěn)定劑處理，然后對所獲樣品用電泳法做純度檢測，計算純度。

9.根據(jù)權利要求1-7任一項所述的人自身免疫性疾病潰瘍性結腸炎診斷試劑盒，其特征是：所述的包被有標識物特異抗原系統(tǒng)的固相板的制備方法為：包括進行粒細胞提取，計算細胞純度和活性檢測，細胞包被步驟，其細胞包被的方法為用1×HBBS稀釋粒細胞，使其至終濃度約為100-1,000,000cells/mL，然后將懸液加入到96孔細胞培養(yǎng)板中，每孔100uL，靜置于室溫，去上清，室溫干燥，后用冷甲醇固定并干燥，用封蓋膜將固定細胞的微孔板封蓋，放置-20℃保存?zhèn)溆茫瞥砂挥袠俗R物特異抗原系統(tǒng)的固相板。

10.一種人自身免疫性疾病潰瘍性結腸炎診斷試劑盒的制備方法，其特征在于：

述的試劑盒包括：

待檢測血清標識物的標準品；

包被有標識物特異抗原系統(tǒng)的固相板；

聯(lián)接有辣根過氧化酶的標識物的抗體；

洗滌液；

辣根過氧化酶底物的溶液；

終止液；

其中所述的待檢測血清標識物的標準品的制備方法為：由高效價抗人中性粒細胞的血清中制備免疫球蛋白G抗血清，提純IgG，經(jīng)QAE化學試劑處理血清并分離血清，將高效價的抗ANCA的免疫球蛋白G血清混合制備，滅活補體，再加穩(wěn)定劑處理，然后對所獲樣品用電泳法做純度檢測，計算純度；

所述的包被有標識物特異抗原系統(tǒng)的固相板的制備方法為：包括進行粒細胞提取，計算細胞純度和活性檢測，細胞包被步驟，其細胞包被的方法為用1×HBBS稀釋粒細胞，使其至終濃度約為100-1,000,000cells/mL，然后將懸液加入到96孔細胞培養(yǎng)板中，每孔100uL，靜置于室溫，去上清，室溫干燥，后用冷甲醇固定并干燥，用封蓋膜將固定細胞的微孔板封蓋，放置-20℃保存?zhèn)溆茫瞥砂挥袠俗R物特異抗原系統(tǒng)的固相板；

所述的辣根過氧化酶連接抗體的采用碘酸鈉法制備；

所述的辣根過氧化酶底物的溶液包含A液和B液，其中A液為過氧化氫溶液，B液為四甲基聯(lián)苯胺溶液或者A液為四甲基聯(lián)苯胺；B液為醋酸鈉/枸櫞酸緩沖液；

所述的終止液為硫酸，洗滌液為磷酸鹽緩沖液。