[發明專利]光激活單分子熒光生物化學反應動力學顯微鏡及試驗方法

有效

• 申請號: 201310236507.2
• 申請日: 2013-06-17
• 公開（公告）號: CN103344617A
• 公開（公告）日: 2013-10-09
• 發明（設計）人: 劉如川
• 申請（專利權）人: 重慶大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;G02B21/06;G02B21/36
• 代理公司: 重慶大學專利中心 50201
• 代理人: 王翔

1.光激活單分子熒光生物化學反應動力學顯微鏡，其特征在于：包括樣品臺（1）、顯微鏡物鏡（2）、成像激光發射器（12）、相機（7）和激活激光發射器（17）；

所述樣品臺（1）的上表面承載透光襯底（18），所述樣品臺（1）具有一個貫通上下表面的通孔，所述透光襯底（18）覆蓋在所述通孔上；

所述透光襯底（18）的上表面承載著相互接觸時會發生生物化學反應的物質分子A和物質分子B，其中，所述物質分子A被固定在透光襯底（18）的上表面，而物質分子B本身是可激活熒光分子或用可激活熒光基團標記了，實驗前，物質分子B溶解或懸浮在溶液中，實驗中，將物質分子B滴加到物質分子A中；

所述透光襯底（18）下方安裝顯微鏡物鏡（2），所述顯微鏡物鏡（2）下方安裝相機（7）；

所述顯微鏡物鏡（2）的前透鏡面向透光襯底（18）的下表面，所述顯微鏡物鏡（2）的主軸延長線與透光襯底（18）的上表面交點為o點；

所述成像激光發射器（12）發射出的成像激光束和激活激光發射器（17）發射出的激活激光束匯聚成一路光束后，以大于臨界角的入射角射入所述o點。

2.根據權利要求1所述的光激活單分子熒光生物化學反應動力學顯微鏡，其特征在于：所述激活激光發射器（17）的前端放置反射鏡（14），所述成像激光發射器（12）前端放置二色鏡Ⅰ（9），所述顯微鏡物鏡（2）下方放置二色鏡Ⅱ（3）；

所述激活激光發射器（17）發出的激活激光光束經過反射鏡（14）的反射后進入二色鏡Ⅰ（9），所述成像激光發射器（12）發射的成像激光束進入二色鏡Ⅰ（9）后與激活激光束并為一束；

并為一束的成像激光束和激活激光束通過二色鏡Ⅱ（3）反射入顯微鏡物鏡（2）后，再經過顯微鏡物鏡（2）折射到o點。

3.根據權利要求2所述的光激活單分子熒光生物化學反應動力學顯微鏡，其特征在于：所述激活激光發射器（17）發出的激活激光光束依次經過濾光片Ⅰ（16）和快門Ⅰ（15）后到達反射鏡（14）；所述成像激光發射器（12）發射的成像激光束依次經過濾光片Ⅱ（11）和快門Ⅱ（10）后進入二色鏡Ⅰ（9）。

4.采用1～3任一項權利要求所述光激活單分子熒光生物化學反應動力學顯微鏡進行試驗的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1）將參與目標反應的物質A固定到透光襯底（18）的上表面；

2）將參與目標反應的物質B滴加到固定在透光襯底（18）上表面的物質A中；所述物質B本身是可激活熒光發光分子或對物質B進行了可激活熒光基團標記；

3）通過相機（7）對o點處進行連續拍攝。