[發明專利]一種紫外可見分光光度法測定瘦肉精含量的方法

無效

• 申請號: 201310236364.5
• 申請日: 2013-06-14
• 公開（公告）號: CN103335963A
• 公開（公告）日: 2013-10-02
• 發明（設計）人: 王利平;李祥梅;李佳琦;沈肖龍
• 申請（專利權）人: 常州大學
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N21/33
• 代理公司: 南京知識律師事務所 32207
• 代理人: 李媛媛

技術領域

本發明屬于分析檢測領域，涉及一種紫外可見分光光度法測定瘦肉精含量的方法。

背景技術

瘦肉精也稱為鹽酸克倫特羅，化學名稱為2-[(叔丁氨基)甲基]-4-氨基-3，5-二氯苯甲醇鹽酸鹽，商品名稱為克喘素。瘦肉精是腎上腺素類神經興奮劑，屬β-興奮劑類激素，在醫學上的用途比較多。后來發現瘦肉精在動物體內具有調節營養物質的流向和重新分配的作用，而且在動物體內能增強脂解和減慢蛋白質分解代謝，可以明顯提高飼料轉化率和瘦肉率，從而在畜牧業中得到廣泛的使用。

近年來動物性產品中瘦肉精殘留對生態食物鏈和人類健康造成了嚴重的危害。人食用過量的鹽酸克倫特羅會出現肌肉振顫，心慌，戰栗，頭疼，惡心等癥狀，尤其對高血壓、心臟病、甲亢和前列腺肥大等疾病患者危害更大，嚴重時能致人猝死。我國已于1997年3月嚴禁瘦肉精在飼料和畜牧生產中使用。然而一些不法商人在利益的驅使下，向飼料中加入大量的瘦肉精，從而嚴重威脅了人體的健康。

公開號為CN102636640A、名稱為“一種瘦肉精分型檢測試紙及其制備方法”專利文獻公開了一種瘦肉精分型檢測試紙的制備方法，其缺陷是：分型檢測試紙制備較復雜，而且瘦肉精檢測的量程窄。公開號為CN1504750A、名稱為“鹽酸克倫特羅檢測試劑條及其制造方法”專利文獻公開了一種檢測鹽酸克倫特羅的試劑條的制備方法，其缺陷是：試劑條制備較繁瑣，試劑條只能一次性使用，價格較昂貴，而且造成資源的浪費。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是克服上述現有技術的不足及國標法測試程序繁瑣、周期長、成本高的缺點，提出一種操作簡便快捷，靈敏度高，測試結果準確，符合精度要求的紫外可見分光光度法測定瘦肉精含量的方法。

本發明解決的技術問題通過以下技術方案實現：

一種紫外可見分光光度法測定瘦肉精含量的方法，包括以下步驟：（1）獲得吸光度與瘦肉精濃度的關系曲線：在酸性條件下，將不同濃度的瘦肉精與亞硝酸鈉發生重氮化反應，然后加入顯色劑8-羥基喹啉，再加入氨水，在常溫下進行顯色反應，最后得到橙黃色的溶液；利用紫外可見分光光度計對所得溶液進行波長掃描，得到最大吸收波長下的吸光度，根據吸光度與其相對應的瘦肉精濃度，得到標準曲線；（2）處理待測樣品，按照上述步驟使待測樣品進行重氮化反應和顯色反應后，采用紫外可見分光光度計測定吸光度，由所述標準曲線得到待測樣品中瘦肉精的含量。

亞硝酸鈉濃度為0.02mg/mL～0.2mg/mL，重氮化反應的溫度為0～5℃。

顯色劑8-羥基喹啉用0.1mol/L的鹽酸溶液溶解，然后在超聲清洗器中振蕩；8-羥基喹啉濃度0.01mg/mL～0.1mg/mL，氨水濃度0.528mg/mL～6.340mg/mL，在室溫下進行顯色反應。

瘦肉精重氮化反應：

瘦肉精與亞硝酸鈉在酸性條件于0～5℃發生重氮化反應。

偶氮化反應：

加入8-羥基喹啉和氨水，于室溫條件下發生偶氮化反應，最后呈現橙黃色。

處理待測樣品的具體步驟為：在樣品中加入適量1mol/L的HCl和去離子水，然后在振蕩器中振蕩，離心分離，再用NaOH調節上清液的pH為7～8，靜置得到上清液作為待測樣品。

本發明的效果是：操作簡便快捷，靈敏度高，測試結果準確，符合精度要求，且不需要昂貴的大型儀器。

附圖說明

圖1為瘦肉精與亞硝酸鈉和8-羥基喹啉反應之后的紫外可見掃描譜圖。

圖2為不同濃度瘦肉精與亞硝酸鈉和8-羥基喹啉反應之后的紫外可見掃描譜圖。其中，a：加入8.08mg/L鹽酸克倫特羅溶液，b：加入7.07mg/L鹽酸克倫特羅溶液，c：加入6.06mg/L鹽酸克倫特羅溶液，d：加入5.05mg/L鹽酸克倫特羅溶液，e：加入4.04mg/L鹽酸克倫特羅溶液，f：加入3.03mg/L鹽酸克倫特羅溶液，g:加入2.53mg/L鹽酸克倫特羅溶液，h:加入2.02mg/L鹽酸克倫特羅溶液。

圖3為瘦肉精濃度與吸光度的標準曲線。

具體實施方式

一種紫外可見分光光度法測定瘦肉精含量的方法，其特征是通過以下步驟實現：在酸性條件下，瘦肉精與亞硝酸鈉發生重氮化反應，然后加入顯色劑8-羥基喹啉，再加入氨水，在常溫下進行顯色反應，最后溶液呈現橙黃色。繪制吸光度與瘦肉精濃度的標準曲線。處理待測樣品，通過重氮化和偶氮化反應，采用紫外可見分光光度計測定吸光度，由標準曲線得到樣品中瘦肉精的含量。