[發明專利]一種大豆及其制品中異黃酮的分析方法

無效

• 申請號: 201310236278.4
• 申請日: 2013-06-16
• 公開（公告）號: CN103323557A
• 公開（公告）日: 2013-09-25
• 發明（設計）人: 青琳森;廖循;薛瑩;彭樹林;丁立生
• 申請（專利權）人: 中國科學院成都生物研究所
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/08
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于食品化學技術領域，具體公開了使用表面鍵合黃芩苷的磁性納米粒子測定大豆及其制品中大豆異黃酮類成分的含量。

技術背景

大豆營養極為豐富，是惟一能夠代替動物蛋白的植物性食物，對女性尤其是更年期女性的健康十分有益，大豆攝入量較大的亞洲國家（如中國、日本等）婦女比美國婦女的乳腺癌發病率低得多【Coward,L.,N.C.Barnes,et?al.Journal?of?Agricultural?and?Food?Chemistry.1993,41(11):1961-1967】。大豆對女性健康的影響主要決定于其所含的大豆異黃酮，其主要由大豆苷元（daidzein，De）染料木素（genistein，Ge）黃豆黃素（glycitein，Gle）、大豆苷（daidzin，Di）、染料木苷（genistin，Gi）和黃豆黃苷（glycitin，Gli）組成。它是一種結構與雌激素相似、具有雌激素活性的植物雌激素。大豆異黃酮具有雙向調節平衡功能，對低雌激素水平者能發揮弱的雌激素樣作用，可防治一些和雌激素水平下降有關的病癥，如更年期綜合征、骨質疏松、血脂升高等；而對于高雌激素水平者，如乳腺癌患者，表現為抗雌激素活性，可防治乳腺癌、子宮內膜癌，預防早老性癡呆。

在我國，大豆的常見食用方式有大豆本身以及豆奶、豆漿、豆芽、豆腐等多種豆制品形式；而以大豆異黃酮為主要成分的保健食品也已成為一種新型暢銷食品，國內外市場上含有大豆異黃酮的保健食品達數十種之多，如威海清華紫光科技生產的金奧力大豆異黃酮膠囊，成都中科生物技術開發有限公司生產的天雌大豆異黃酮營養片、紅牛維他命飲料有限公司開發的大豆異黃酮保健飲料、廣東九極日用保健品有限公司生產的九極牌麗延口服液等、美國C1ifbar公司開發出添加了大豆異黃酮的運動飲料和美國加州Imagine食品公司開發含大豆異黃酮的能量飲料等。

不同的豆制品食品，大豆異黃酮的含量不同；而不同的大豆異黃酮類保健品其含量差別更大，甚至有的產品的實際含量遠小于標示含量。為了保障消費者的利益，也為企業提供更好的技術支持，因此建立一種簡便適用、快速方便大豆異黃酮含量的檢測方法很有必要。目前，關于大豆異黃酮的測定方法已有不少文獻以及兩個國標【GB/T23788-2009《保健食品中大豆異黃酮的測定方法測定高效液相色譜法》和GB/T26625-2011《糧油檢驗大豆異黃酮含量測定高效液相色譜法》】的報道，但這些方法的樣品制備大都是基于有機溶劑提取后離心，選擇性低、費時費力；而且，由于液態產品基質極其復雜，因此有機溶劑提取后離心的方法不適合液體產品中大豆異黃酮的測定。為此，部分研究文獻提出采用冷凍干燥法制備液體樣品，如Toro-Funes等最近發表的論文即先將液態的豆奶冷凍干燥成為固態，然后按照固態樣品的方法進行有機溶劑提取【Toro-Funes,N.,et?al.Food?Chemistry,2012,135(4):2832-2838】。雖然，冷凍干燥法解決了液態產品的測定制樣問題，但是該法需要2天的樣品制備時間，甚為不便，急需進一步改進。

最近幾年開始發展的磁性固相萃取技術極大地推動了樣品前處理領域的進步。申請人曾經申請了黃芩苷修飾的磁性納米粒子用于黃酮類化合物的富集與分離的專利【一種表面鍵合黃芩苷磁性納米粒子及其制備方法和用途.申請號：201010545352】。經過進一步的研究，對表面鍵合黃芩苷的磁性納米粒子的合成方法進行了優化和改進，從而得到了粒度更均勻、黃芩苷鍵合量更大的材料；而且發現其應用于大豆及其制品中大豆異黃酮類化合物的富集與分離。吸附在表面鍵合黃芩苷磁性納米粒子表面的大豆異黃酮可以通過外磁場與黃芩苷修飾的磁性納米粒子本身一起被方便地分離出來，大大提高樣品制備的選擇性和速率，適合各種狀態的樣品測定，從而解決了目前存在的問題。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的缺陷，提供一種大豆異黃酮富集和萃取方法，操作簡單、效率高、選擇性好，并應用于大豆及大豆制品中大豆異黃酮的含量測定。

本發明提供的表面鍵合黃芩苷磁性納米粒子，是將超順磁的納米四氧化三鐵與黃芩苷反應，生成表面鍵合黃芩苷的磁性納米粒子，其結構如附圖1所示，其制備方法如下：