[發明專利]一種大豆及其制品中異黃酮的分析方法

無效

• 申請號: 201310236278.4
• 申請日: 2013-06-16
• 公開（公告）號: CN103323557A
• 公開（公告）日: 2013-09-25
• 發明（設計）人: 青琳森;廖循;薛瑩;彭樹林;丁立生
• 申請（專利權）人: 中國科學院成都生物研究所
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/08
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種大豆及其制品中異黃酮的分析方法，其特征是：使用表面鍵合黃芩苷磁性納米粒子在大豆及其制品的溶液中選擇性地富集和萃取大豆異黃酮類化合物。

2.權利要求1所述的大豆及其制品中異黃酮的分析方法，其特征在于：所述的大豆制品是指以大豆為主要原料生產的食品、保健品。

3.權利要求1所述的大豆及其制品中異黃酮的分析方法，其特征在于：所述的大豆制品是豆奶、豆漿、豆芽、豆腐、豆腐絲、豆腐皮、豆腐干、腐竹、素火腿、腐乳、豆豉、大豆蛋白膠囊、大豆異黃酮片、大豆異黃酮膠囊或大豆異黃酮口服液。

4.權利要求1所述的大豆及其制品中異黃酮的分析方法，其特征在于：所述大豆異黃酮類化合物為：大豆苷元（daidzein，De）、染料木素（genistein，Ge）、黃豆黃素（glycitein，Gle）、大豆苷（daidzin，Di）、染料木苷（genistin，Gi）和黃豆黃苷（glycitin，Gli）。

5.權利要求1所述的大豆及其制品中異黃酮的分析方法，其特征在于：所述的表面鍵合黃芩苷磁性納米粒子是將氨基末端磁性納米粒子與黃芩苷反應生成，磁性納米粒子為超順磁的納米四氧化三鐵，整個納米粒子的粒度為1nm～200nm之間，黃芩苷的鍵合量為4～8%。

6.權利要求1所述的大豆及其制品中異黃酮的分析方法，其特征是：所述的表面鍵合黃芩苷磁性納米粒子的制備方法為：

首先合成氨基末端磁性納米粒子：將5～7g1,6-己二胺、1～3g無水醋酸鈉和1g的FeC₃·6H₂O溶解在20～50mL的乙二醇中，于40～60°C攪拌至透明澄清；然后將此溶液轉移至聚四氟乙烯內襯的高壓釜中190～205°C反應4～8h；用磁鐵吸附分離并依次用純水、乙醇清洗2～4次，最后減壓干燥即得到氨基末端磁性納米粒子；

然后合成表面鍵合黃芩苷磁性納米粒子：將黃芩苷和氨基末端磁性納米粒子以1:2～1:5的質量比混懸于8～12mL75%的DMSO/磷酸緩沖液（10mM,pH5.5）中，再加入35mg1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺和N-羥基琥珀酰亞胺磺酸鈉鹽，震蕩1～5h；用磁鐵吸附分離得到的磁性納米粒子并依次用75%的DMSO和水重新分散清洗2～3次，減壓干燥即得表面鍵合黃芩苷磁性納米粒子。

7.權利要求1所述的大豆及其制品中異黃酮的分析方法，其特征是：具體方法為：

1)大豆及其制品原始溶液的獲得：對于固態的大豆及其制品，粉碎，過5～9號《中國藥典》所規定的標準藥典篩，取粉末適量，加入0～20%的甲醇/水或乙醇/水至0.001～0.1mg/mL，超聲波輔助提取5～30min；對于液態的大豆制品，直接使用該溶液即可；

2)使用表面鍵合黃芩苷磁性納米粒子吸附大豆異黃酮成分：將10～500mg表面鍵合黃芩苷磁性納米粒子分散于上述溶液中，充分混合，用力振搖1～10min，使大豆異黃酮類化合物充分吸附在表面鍵合黃芩苷磁性納米粒子上；

3)使用外磁場分離吸附有大豆異黃酮類化合物的表面鍵合黃芩苷磁性納米粒子：使用外磁場將吸附有大豆異黃酮類化合物的表面鍵合黃芩苷磁性納米粒子聚集在一起，將所剩溶液傾倒、丟棄；

4)將大豆異黃酮從鍵合黃芩苷磁性納米粒子上洗脫下來：撤去外磁場，加入0.1～1mL洗脫溶劑，充分混合，用力振搖1～10min，使大豆異黃酮類化合物與表面鍵合黃芩苷磁性納米粒子分離，而溶解于洗脫溶劑甲醇或乙醇或乙腈或乙酸乙酯或二甲亞砜或N,N-二甲基甲酰胺中；

5)使用外磁場將表面鍵合黃芩苷磁性納米粒子吸附在一起，然后將上述的洗脫溶液吸取出來，供儀器分析使用。