[發明專利]以聚肌苷酸-聚胞苷酸為主的佐劑

無效

• 申請號: 201310236248.3
• 申請日: 2005-06-08
• 公開（公告）號: CN103405762A
• 公開（公告）日: 2013-11-27
• 發明（設計）人: 林海祥
• 申請（專利權）人: 依生生物制藥（新加坡）私人有限公司
• 主分類號: A61K39/39
• 分類號: A61K39/39
• 代理公司: 北京戈程知識產權代理有限公司 11314
• 代理人: 程偉

本申請是申請號為200580015097.2，申請日為2005年6月8日，發明名稱為“以聚肌苷酸-聚胞苷酸為主的佐劑”的中國專利申請的分案申請。

技術領域

本發明主要關于佐劑組合物以及使用這些佐劑組合物來促進免疫反應的方法，它特定關于用以促進抗原的免疫原性（immunogenicity）的組合物、疫苗和方法。它更特定關于聚核苷酸佐劑組合物、含有該聚核苷酸佐劑組合物的疫苗，以及利用所述聚核苷酸佐劑組合物和疫苗來促進宿主體內的免疫反應的方法。

背景技術

相關技術的敘述

免疫系統具有產生特異性和非特異性免疫力。一般而言，B和T淋巴細胞在他們的細胞表面上有針對特定抗原的特定受體，能產生特異性免疫。該免疫系統會對各抗原以二種方式特異免疫反應：1）體液免疫反應，涉及刺激B細胞產生抗體或免疫球蛋白、抗原提呈細胞（APCs）功能及輔助性T細胞（Th1和Th2）功能，以及2）細胞免疫反應，一般涉及T細胞、包括細胞毒性T淋巴細胞（CTLs）和其它涉及CTL反應的產生例如，Th1和/或Th2細胞以及APCs。

非特異性免疫包含多種細胞作用機制，例如巨噬細胞（macrophages）或顆粒細胞（granulocytes）的吞噬作用（phagocytosis）以吞噬外來顆粒或抗原，以及天然殺傷細胞（NK細胞）活性等。非特異性免疫力依賴是原來的免疫機制，且不會展現出特異性和記憶性的獲得性特性，該獲得性特性是特異性免疫反應的典型特點。特異性和非特異性免疫之間的關鍵性差異是前者由淋巴細胞介導識別特異性抗原基序，具有記憶功能；而后者沒有此功能。因此接種疫苗（涉及免疫特異性和記憶性）是一種保護機體以對抗有害病原體的有效機制。

佐劑是增強機體對抗原的免疫反應或改變免疫反應類型的物質，當它和抗原共同給予時（與該抗原相混合，或在給予該抗原以前或后給予）會促進或改變對于該特定抗原的免疫反應及免疫反應的類型。

常見促進免疫反應的典型佐劑包括：鋁化合物（該佐劑常被通稱為鋁佐劑Alum）、水包油乳劑（完全弗氏佐劑CFA是一種水包油乳劑，含有經干燥和熱殺滅的結核桿菌）、皂甙（從皂質樹Quillaja?Saponoria皮分離而來，該佐劑活性成份被稱為Quile?A）、CpG?ODN（合成寡去氧核苷酸，含有去甲基化的CpG二聚核苷酸）、MPL（從明尼蘇達Re595沙氏桿菌（Salmonella?minnesota?Re595）的脂多醣衍生而來）、脂質體（通常由如磷脂等可生物降解性材料制成）以及可生物降解性聚合微球體（由如PLGA、聚膦腈（polyphosphazene）和聚酐等多種聚合物制成）。這些物質的佐劑性質已經過評估各有優缺點。

將佐劑應用在人用疫苗，特別是兒童用常規疫苗的最大挑戰在于大多數佐劑配方產生毒性和不良反應或者佐劑效果不顯著。在疫苗研發所運用的新技術正朝向純化、亞單位或合成抗原發展，這些抗原本身具有較弱的免疫原性。開發新佐劑以改善免疫原性/有效性并減低不良副作用是疫苗研發面對的一個主要挑戰。

聚核苷酸復合物已在試驗用作佐劑等多種用途上。雙鏈RNAs（dsRNAs）是非常有效的生物修飾因子，可在毫微摩爾濃度下對細胞引起明顯作用。dsRNA的調控效應包括在分子和細胞水平上廣泛的作用。

在分子水平上，dsRNAs可誘導如干擾素（interferon）的合成、蛋白質激酶的產生、增進組織兼容性抗原以及抑制代謝作用等生物效應。在細胞水平上，dsRNA可激發如熱原性（pyrogenicity）、細胞分裂（mitogenicity）、巨噬細胞活化、活化細胞免疫以及引發抗病毒等生物效應。dsRNAs的巨大前景在于抗微生物治療上的免疫調控效應。美國專利第4,124,702號提出dsRNAs在活的動物細胞中誘導干擾素產生。美國專利第3,906,092號提出含有聚核苷酸或聚核苷酸復合物的佐劑型疫苗抗體產生增強。Houston等人建立PICLC（聚肌苷酸聚胞苷酸poly-L-賴氨酸-羧甲基纖維素復合物）作一種有效的佐劑，藉此增加初級抗體反應而無需其它佐劑的輔助（參見Houston等人,Infection?and?Immunity,14:318-9,1976C）。霉病毒型dsRNA（Mycoviral?dsRNA）被發現能顯著地增進凝血抗體對于綿羊紅血球細胞的反應（參見Wright?and?Adler-Moore,Biochemical?and?Biophysical?Research?Communications,131:949-45,1985）。