[發明專利]一種用于糖基分離的微流控凝集素芯片及其制備方法

有效

• 申請號: 201310229106.4
• 申請日: 2013-06-08
• 公開（公告）號: CN103344464A
• 公開（公告）日: 2013-10-09
• 發明（設計）人: 孫東平;陳春濤;聶英;朱春林;黃洋;楊加志
• 申請（專利權）人: 南京理工大學
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28;B01L3/00
• 代理公司: 南京理工大學專利中心 32203
• 代理人: 朱顯國

1.一種用于糖基分離的微流控凝集素芯片，其特征在于，包括微型柱通道、樣品通道、樣品入口[1]、填料入口[2]、柱前監測點[3]、微型柱[4]、填料出口[5]、柱后監測點[6]、樣品出口[7]、玻璃蓋片[12]、玻璃基底[13]、聚四氟乙烯管[14]；其中微型柱通道包括微型柱通道前部[8]、微型柱[4]、微型柱通道后部[9]，樣品通道包括樣品通道前部[10]、微型柱[4]、樣品通道后部[11]，且微型柱通道與樣品通道于微型柱[4]處重疊，其中樣品通道前部[10]、微型柱[4]、樣品通道后部[11]位于同一水平線上，微型柱通道前部[8]與微型柱通道后部[9]分別位于樣品通道上下兩側，微型柱通道前部[8]與樣品通道前部[10]的角度為α，微型柱通道后部[9]與樣品通道后部[11]的角度為β；微型柱通道前端設有填料入口[2]，微型柱通道末端設有填料出口[5]，樣品通道前端設有樣品入口[1]，樣品通道末端設有樣品出口[7]，所述填料入口[2]、填料出口[5]、樣品入口[1]、樣品出口[7]分別與一根聚四氟乙烯管[14]連接；樣品通道前部設有柱前監測點[3]，樣品通道后部設有柱后監測點[6]；所述微型柱通道與樣品通道均刻蝕于玻璃蓋片[12]，玻璃蓋片[12]與玻璃基底[13]于刻蝕面鍵合；其中微型柱[4]中填充的物質為連接有凝集素的細菌纖維素。

2.?根據權利要求1所述的用于糖基分離的微流控凝集素芯片，其特征在于，所述0°＜α≤90°，0°＜β≤90°。

3.一種用于糖基分離的微流控凝集素芯片的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟一，繪制通道圖形，將設計好的通道圖形打印在膠片上制成掩膜；?

步驟二，采用紫外刻蝕的方法將掩模板上的圖形轉移到玻璃蓋片[12]上；

步驟三，將經過刻蝕后的玻璃蓋片[12]在超聲波打孔機下于通道末端位置打孔，形成通道出入口，將打孔后的玻璃蓋片[12]經過清洗后置于濃硫酸中活化，并與玻璃基底[13]鍵合，冷卻后酸洗；

步驟四，將細菌纖維素進行堿化處理，離心浸泡中和干凈，粉碎，過篩，乙醇活化干燥后于溶劑中溶解，封閉樣品入口[1]和樣品出口[7]，然后將溶解后的細菌纖維素由填料入口注入微型柱[4]的位置，冷凍干燥使再生細菌纖維素蓬松將柱子填滿，清洗干凈；

步驟五，向樣品入口[1]和樣品出口[7]中注溶解后的高取代羥丙基纖維素進行通道改性，過夜室溫放置后洗干凈；

步驟六，選定凝集素，封閉填料入口[2]和填料出口[5]，調節環氧氯丙烷pH，再將環氧氯丙烷于樣品入口[1]通入通道中，放置，然后在凝集素等電點條件下，將凝集素溶于TBS緩沖液后于樣品入口[1]通入通道中；

步驟七，封閉填料入口[2]和填料出口[5]，將糖基物質溶解于磷酸緩沖溶液，并于樣品入口[1]中通入芯片進行分離，后將光譜掃描儀置于芯片柱前監測點[3]、柱后監測點[6]上方進行在線檢測；其中整個過程中以聚四氟乙烯管[10]作為進樣管道。

4.根據權利要求3所述的用于糖基分離的微流控凝集素芯片的制備方法，其特征在于，步驟一中，采用AutoCAD軟件繪制通道圖形，將設計好的通道圖形導入AdobeIllustrator通過分辨率大于3000dpi的高分辨率打印機打印在菲林膠片上制成掩膜；其中，所述通道圖形包括微型柱通道和樣品通道，所述微型柱通道包括微型柱通道前部[8]、微型柱[4]、微型柱通道后部[9]，樣品通道包括樣品通道前部[10]、微型柱[4]、樣品通道后部[11]，且微型柱通道與樣品通道于微型柱[4]處重疊，其中樣品通道前部[10]、微型柱[4]、樣品通道后部[11]位于同一水平線上，微型柱通道前部[8]與微型柱通道后部[9]分別位于樣品通道上下兩側，微型柱通道前部[8]與樣品通道前部[10]的角度為α，微型柱通道后部[4]與樣品通道后部[4]的角度為β，其中0°＜α≤90°，0°＜β≤90°；所述掩模板制作的微結構線寬為0，通道寬為10~400μm，微型柱[4]長度為20~400㎜。