[發明專利]一種綠盲蝽膜結合型海藻糖酶、其編碼序列、載體、菌株及應用有效
| 申請號: | 201310227703.3 | 申請日: | 2013-06-07 |
| 公開(公告)號: | CN103275999A | 公開(公告)日: | 2013-09-04 |
| 發明(設計)人: | 譚永安;肖留斌;柏立新;孫洋 | 申請(專利權)人: | 江蘇省農業科學院 |
| 主分類號: | C12N15/56 | 分類號: | C12N15/56;C12N9/24;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/21;C12N15/70;C12R1/19 |
| 代理公司: | 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204 | 代理人: | 王云 |
| 地址: | 210014 *** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 綠盲蝽膜 結合 海藻 編碼 序列 載體 菌株 應用 | ||
1.一種用于編碼綠盲蝽膜結合型海藻糖酶的DNA序列,其堿基序列如SEQ?ID?NO:1所示。
2.一種綠盲蝽膜結合型海藻糖酶,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ?ID?NO:2所示。
3.含有權利要求1所述的用于編碼綠盲蝽膜結合型海藻糖酶的DNA序列的重組表達載體、轉基因細胞系統或轉基因重組菌。
4.根據權利要求3所述的重組表達載體,其特征在于,將權利要求1所述的DNA序列插入到大腸桿菌表達載體中得到的表達綠盲蝽膜結合型海藻糖酶的重組表達載體。
5.根據權利要求4所述的重組表達載體,其特征在于,所述大腸桿菌表達載體為PET28a。
6.根據權利要求5所述的轉基因重組菌,其特征在于,所述重組菌是將權利要求4或5所述的重組表達載體導入大腸桿菌中,篩選得到轉基因重組菌。
7.根據權利要求6所述的轉基因重組菌,其特征在于,所述的大腸桿菌為BL21(DE3)。
8.權利要求1所述的DNA序列、權利要求3所述的重組表達載體、轉基因細胞系統或轉基因重組菌在生產綠盲蝽膜結合型海藻糖酶中的應用。
9.一種綠盲蝽膜結合型海藻糖酶的制備方法,是培養權利要求3或6所述的轉基因重組菌得到的綠盲蝽膜結合型海藻糖酶。
10.一種綠盲蝽膜結合型海藻糖酶的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
1)、綠盲蝽膜結合型海藻糖酶基因的擴增;
2)、綠盲蝽膜結合型海藻糖酶基因原核表達載體構建;
3)、綠盲蝽膜結合型海藻糖酶蛋白的變性和復性;
4)、綠盲蝽膜結合型海藻糖酶蛋白的純化即得到綠盲蝽膜結合型海藻糖酶。
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