[發(fā)明專利]同時分析卷煙主流煙氣中三種多環(huán)芳烴和四種煙草特有亞硝胺的GC-MS/MS方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310226805.3
• 申請日: 2013-06-08
• 公開（公告）號: CN103257194A
• 公開（公告）日: 2013-08-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 邊照陽;陳曉水;唐綱嶺;陳再根;劉珊珊;楊飛;劉洋;張洪非;李中皓;胡清源
• 申請（專利權(quán)）人: 國家煙草質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14
• 代理公司: 鄭州中民專利代理有限公司 41110
• 代理人: 姜振東

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于卷煙煙氣中有害物質(zhì)檢測技術(shù)領(lǐng)域，主要涉及卷煙主流煙氣中的苯并[a]蒽(BaA)、屈(Chrysene)、苯并[a]芘(BaP)等三種多環(huán)芳烴和NNN、NAT、NAB、NNK等四種煙草特有亞硝胺（TSNAs）的測定技術(shù)。

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背景技術(shù)

以苯并[a]芘為代表的多環(huán)芳烴和以NNK為代表的煙草特有亞硝胺（TSNAs）是卷煙主流煙氣中的兩類主要有害物質(zhì)，致癌作用強(qiáng)，對以往的動物或人體毒理學(xué)研究的權(quán)重分析表明，煙草中致癌作用最強(qiáng)的正是TSNAs與PAHs，它們一直都是人們研究的熱點(diǎn)。

卷煙主流煙氣中的苯并[a]芘和煙草特有N-亞硝胺常以兩個不同的方法進(jìn)行檢測分析，以《GB/T?21130-2007?卷煙?煙氣總粒相物中苯并[a]芘的測定》和《GB/T?23228-2008?卷煙?主流煙氣總粒相物中煙草特有N-亞硝胺的測定?氣相色譜－熱能分析聯(lián)用法》為代表。對主流煙氣中的TSNAs的測定方法主要是GC-TEA，近年來出現(xiàn)了LC-MS/MS的檢測方法，GC/MS也被用于TSNAs的檢測；分析BaP的方法主要是GC/MS，高效液相色譜法也被用于BaP的檢測。

GC/MS法測卷煙主流煙氣中的多環(huán)芳烴一般用含內(nèi)標(biāo)的正己烷或環(huán)己烷等有機(jī)溶劑浸提煙氣總粒相物，萃取液用硅膠固相萃取柱凈化，洗脫液經(jīng)濃縮后，進(jìn)行GC/MS分析，以選擇離子監(jiān)測（SIM）模式定量，具有回收率高，靈敏度高，重復(fù)性好，定量準(zhǔn)確等特點(diǎn)，但樣品前處理過程中需要繁瑣的固相萃取過程及濃縮過程，費(fèi)時費(fèi)力，且對焦油含量小于1?mg/cig卷煙的主流煙氣中多環(huán)芳烴的GC/MS檢測過程中發(fā)現(xiàn)，苯并[a]芘的含量多低于1?ng/cig，此時苯并[a]芘的GC/MS色譜峰偏低，給定量帶來一定的困難。

對于GC-TEA法測定主流煙氣總粒相物中煙草特有N-亞硝胺，由于熱能分析儀只對亞硝胺和亞硝酸酯響應(yīng)，是專一性的檢測器，所以具有相當(dāng)高的選擇性和靈敏度，但該法的缺點(diǎn)是純化步驟多，分析時間長，且對于煙草特有N-亞硝胺含量特低的烤煙型卷煙，GC-TEA的靈敏度就略顯不夠。

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發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明的目的正是基于上述現(xiàn)有技術(shù)狀況而提供一種同時分析卷煙主流煙氣中三種多環(huán)芳烴和四種煙草特有亞硝胺的GC-MS/MS方法，利用該方法簡化了吸煙過程，簡化了樣品前處理的操作，同時提高了檢測儀器的靈敏度。

本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的：本發(fā)明的同時分析卷煙主流煙氣中三種多環(huán)芳烴和四種煙草特有亞硝胺的GC-MS/MS方法，是將捕集有卷煙主流煙氣粒相物的劍橋?yàn)V片取出后，加入乙酸乙酯和內(nèi)標(biāo)物，振蕩提取后，取萃取液經(jīng)分散固相萃取（d-SPE）,然后取上清液氮吹濃縮后，以氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（GC-MS/MS）進(jìn)行測定，具體步驟如下：

a、內(nèi)標(biāo)溶液的配制：配制d₄-NNN、d₄-NAT、d₄-NAB、d₄-NNK和d₁₂-BaP濃度均為4?μg/mL的丙酮溶液；

b、準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：分別稱取0.010?g（精確至0.1?mg）標(biāo)準(zhǔn)品，置于同一10?mL容量瓶中，用丙酮溶解并定容，然后用乙酸乙酯稀釋并最終配制成具有濃度梯度的各種目標(biāo)物的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液；

c、樣品制備：按ISO?3308:2000方法收集5支卷煙的粒相物后，取下劍橋?yàn)V片；?

d、振蕩萃?。簻?zhǔn)確加入10?mL乙酸乙酯和100?μL內(nèi)標(biāo)溶液，在振蕩儀上以200?rpm?振蕩萃取30?min；

e、基質(zhì)分散固相萃?。╠-SPE）：取5?mL萃取液加入到基質(zhì)分散固相萃取離心管中（內(nèi)含900?mg?MgSO₄，250?mg?PSA）,在漩渦混合振蕩器上以2000?rpm的轉(zhuǎn)速振蕩2?min，在高速離心機(jī)上以6000?rpm離心3?min。

f、取上清液3?mL在45?℃恒溫水浴中氮?dú)鉂饪s至干后，用1?mL乙酸乙酯復(fù)溶，過0.22?μm有機(jī)濾膜后，收集在自動進(jìn)樣色譜小瓶中；

g、GC-MS/MS測定:b中的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液或f中的樣品提取液可上機(jī)測定;