[發明專利]一種甘蔗渣多糖分離純化的方法

有效

• 申請號: 201310221570.9
• 申請日: 2013-06-05
• 公開（公告）號: CN103333265A
• 公開（公告）日: 2013-10-02
• 發明（設計）人: 劉強;張斌;劉莉;朱紅霞;李沙沙;江曉
• 申請（專利權）人: 南方醫科大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 廣州新諾專利商標事務所有限公司 44100
• 代理人: 周端儀

1.一種甘蔗渣多糖分離純化的方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）脫脂：取甘蔗渣以乙醇浸泡、回流，濾過后濾渣烘干；

（2）提取：步驟（1）所得濾渣經水提醇沉法得粗多糖；

（3）脫蛋白：步驟（2）所得粗多糖用水溶解，通過sevag法將蛋白分離；

（4）透析：步驟（3）所得的粗品濃縮，離心，將上清液在水中透析，去除小分子雜質，收集甘蔗渣多糖溶液；

（5）冷凍干燥：步驟（4）所得甘蔗渣多糖濃縮后冷凍干燥，得甘蔗渣多糖干品；

（6）純化：將步驟（5）所得甘蔗渣多糖經離子交換色譜法與凝膠色譜法純化；

（7）冷凍干燥，得到甘蔗渣多糖純品粉末。

2.根據權利要求1所述的一種甘蔗渣多糖分離純化的方法，其特征在于：所述的步驟（1）中，取一定量的甘蔗渣，加入6-12倍量95%乙醇浸泡30-60min，回流4-8h，濾過，濾渣烘干。

3.根據權利要求1所述的一種甘蔗渣多糖分離純化的方法，其特征在于：所述步驟（2）中的水提醇沉法是：將步驟（1）所得濾渣依次加8-12倍量、6-10倍量水回流提取一次以上，每次2-4h，濾過合并濾液，濾液濃縮，加3-5倍量95%乙醇，靜置，抽濾，濾渣經干燥得粗多糖。

4.根據權利要求1所述的一種甘蔗渣多糖分離純化的方法，其特征在于：所述步驟（3）中的sevag法是：將步驟（2）所得甘蔗渣粗多糖用水溶解，將氯仿按多糖溶液1/5體積加入，隨之加入氯仿體積1/5的正丁醇，混合劇烈振搖攪拌后，以2000-6000rpm，10-30min離心，出去蛋白，如此重復7-10次。

5.根據權利要求1所述的一種甘蔗渣多糖分離純化的方法，其特征在于：所述步驟（4）中的透析是：步驟（3）所得的粗品濃縮，離心，得上清液，用截留分子量3000的透析袋將上清液在流水中透析40-55h，再在去離子水中透析20-30h，收集甘蔗渣多糖溶液。

6.根據權利要求1所述的一種甘蔗渣多糖分離純化的方法，其特征在于：所述的步驟（6）中，離子交換色譜法采用陰離子交換色譜柱，優選DEAE-52纖維素、DEAE-32纖維素、DEAE-Sepharose?fast?flow、DEAE-Cellulose。

7.根據權利要求1所述的一種甘蔗渣多糖分離純化的方法，其特征在于：所述的步驟（6）中，凝膠色譜法采用葡聚糖凝膠柱、瓊脂糖凝膠凝膠柱或DEAE-葡聚糖凝膠柱，優選Sephadex?G-50、Sephadex?G-75、Sephadex?G-100、Sephadex?G-150、Sephadex?G-200、Sephacryl?S-100、Sephacryl?S-200、Sephacryl?S-300、Sephacryl?S-400、Sephacryl?S-500、Sephadex?LH-20、Sephadex?LH-60、DEAE?Sepharose?CL-6B、DEAE?Sephadex?A-50、DEAE?Sephadex?A-25。

8.根據權利要求1或6所述的一種甘蔗渣多糖分離純化的方法，其特征在于：所述的步驟（6）中，離子交換色譜法為：采用陰離子交換色譜柱，流速0.2-0.8ml/min，先后以水、0-0.5mol/LNaCl洗脫，分離出兩個組分。

9.根據權利要求1或7所述的一種甘蔗渣多糖分離純化的方法，其特征在于：所述的步驟（6），凝膠色譜法中至少過兩次凝膠柱，在后的凝膠柱的分離精度高于在先的凝膠柱。

10.根據權利要求9所述的一種甘蔗渣多糖分離純化的方法，其特征在于：所述的的步驟（6）中，凝膠色譜法為：i.將經離子交換色譜法分離出的組分上第一凝膠柱純化，以水洗脫，流速0.2-0.8ml/min，濃縮后冷凍干燥；ii.然后上第二凝膠柱，以水洗脫，流速0.2-0.8ml/min。