[發明專利]H7N9禽流感病毒二重熒光定量RT-PCR檢測試劑盒

有效

• 申請號: 201310215952.0
• 申請日: 2013-06-03
• 公開（公告）號: CN103255236A
• 公開（公告）日: 2013-08-21
• 發明（設計）人: 謝芝勛;羅思思;劉加波;龐耀珊;鄧顯文;謝志勤;謝麗基;范晴
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區獸醫研究所
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/68;G01N21/64
• 代理公司: 廣西南寧公平專利事務所有限責任公司 45104
• 代理人: 楊立華

1.一種H7N9禽流感病毒二重熒光定量RT-PCR檢測試劑盒，其特征在于包括引物組和探針組；引物組有引物1至4，它們分別具有序列表SEQ.ID.No.1至SEQ.ID.No.4的堿基序列；探針組有探針A和探針B，它們分別具有序列表SEQ.ID.No.5至SEQ.ID.No.6的堿基序列。

2.根據權利要求1所述的H7N9禽流感病毒二重熒光定量RT-PCR檢測試劑盒，其特征在于：所述探針A的5’端標記有報告熒光染料FAM，3’端標記有淬滅熒光染料Eclipse；所述探針B的5’端標記有報告熒光染料ROX，3’端標記有淬滅熒光染料Eclipse。

3.根據權利要求2所述的H7N9禽流感病毒二重熒光定量RT-PCR檢測試劑盒，其特征在于：所述引物1、引物2、探針A、引物3、引物4和探針B的摩爾比為1：1：2：1：1：1。

4.根據權利要求3所述的H7N9禽流感病毒二重熒光定量RT-PCR檢測試劑盒，其特征在于包括反轉錄反應液、PCR反應液、DEPC水和超純水；

所述反轉錄反應液每管16μL，含有5×Reverse?Transcriptase?Buffer10μL、50pmol9mer?Random?Primer2μL、10mM?dNTP?Mixture2μL、40U?Ribonuclease?Inhibitor1μL和5U/μL?AMV?Reverse?Transcriptase1μL；

所述PCR反應液每管11.4μL，含有2×Premix?Ex?Taq10μL，20μM?H7亞型禽流感病毒正向、反向引物和TaqMan探針分別0.2μL、0.2μL、0.4μL，20μM?N9亞型禽流感病毒正向、反向引物和TaqMan探針各0.2μL；

所述DEPC水和超純水各1mL。