[發(fā)明專利]位點突變的高活熱穩(wěn)定性納豆激酶基因及其應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201310211134.3 | 申請日： | 2013-05-30 |
| 公開（公告）號： | CN103255156A | 公開（公告）日： | 2013-08-21 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 唐選明;李淑英;聶瑩 | 申請（專利權(quán)）人： | 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所 |
| 主分類號： | C12N15/57 | 分類號： | C12N15/57;C12N9/56;C12R1/125 |
| 代理公司： | 北京海虹嘉誠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11129 | 代理人： | 張濤 |
| 地址： | 100193 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 突變 熱穩(wěn)定性 激酶 基因 及其 應(yīng)用 | ||
1.一種納豆激酶基因，其核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1所示。
2.權(quán)利要求1所述的基因，其活性位點位于如SEQ?ID?NO:1的核苷酸序列的106位、481位、524位和674位。
3.權(quán)利要求1所述的基因，與野生型納豆激酶基因aprN相比，共有4個核苷酸位點發(fā)生突變：106位核苷酸由A變?yōu)镚，密碼子由AAA到AAG；481位核苷酸由T變?yōu)镃，密碼子由GTT變?yōu)镚TC；524位核苷酸由A變?yōu)镚，密碼子由ACG變?yōu)镚CG；674位核苷酸由T變?yōu)镃，密碼子由TCC變?yōu)镃CC。
4.權(quán)利要求1所述基因在制備高活、熱穩(wěn)定性納豆激酶中的應(yīng)用。
5.一種納豆激酶多肽，其氨基酸序列如SEQ?ID?NO:2所示。
6.權(quán)利要求5所述的多肽，與天然納豆激酶相比，特征是：SEQ?ID?NO:2的一個或一個以上不穩(wěn)定區(qū)經(jīng)過氨基酸殘基的替換形成具有更高納豆激酶活性和/或熱穩(wěn)定性的多肽，所述不穩(wěn)定區(qū)選自SEQ?ID?NO:2中169-178、203-216、223-230、234-243、260-274和345-363。
7.權(quán)利要求6所述的多肽，其中所述替換是不穩(wěn)定區(qū)169-178和不穩(wěn)定區(qū)223-230發(fā)生單個氨基酸替換。
8.權(quán)利要求6所述的多肽，其中所述替換是不穩(wěn)定區(qū)169-178的175位Thr變?yōu)锳la；不穩(wěn)定區(qū)223-230的225位Ser變?yōu)镻ro。
9.權(quán)利要求5～8任一所述的多肽在制備納豆激酶類產(chǎn)品中的應(yīng)用。
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