[發明專利]一種中藥注射劑中熱原去除工藝的評價方法

有效

• 申請號: 201310209207.5
• 申請日: 2013-05-30
• 公開（公告）號: CN103308658A
• 公開（公告）日: 2013-09-18
• 發明（設計）人: 崔仁海;李文春;李長新;解黎雯;張麗君;付饒;單鈺毓;蘇德龍;裴福成;王英新
• 申請（專利權）人: 哈藥集團中藥二廠
• 主分類號: G01N33/15
• 分類號: G01N33/15;G01N21/82
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專利商標事務所 23109
• 代理人: 高會會

技術領域

本發明涉及熱原去除工藝的評價方法。

背景技術

熱原（Pyrogen）又稱內毒素（Endotoxin），產生于革蘭氏陰性（Gram-nagative）細菌的細胞外壁，亦即細菌尸體的碎片。進一步分析其主要成份是脂多糖（LPS）及類脂A，是熱原的活性部分。它們的相對分子質量一般為1萬～2.5萬，在水溶液中形成締合體，相對分子質量可達50萬～100萬。這類物質具有耐熱性和化學穩定性，不易被除滅。注入人體的注射劑中含有熱原量達1μg/kg就可引起不良反應，發熱反應通常在注入1小時后出現，可使人體產生發冷、寒顫、發熱、出汗、惡心、嘔吐等癥狀，有時體溫可升至40℃以上，嚴重者甚至昏迷、虛脫，如不及時搶救，可危及生命。該現象稱為“熱原反應”。因此國家食品藥品監督管理局在《中藥注射劑安全性再評價生產工藝評價技術原則（試行）》指出“生產工藝過程中應明確除熱原(或細菌內毒素)的方法及條件，如活性炭的用量、處理方法、加入時機、加熱溫度及時間等，并考察除熱原效果及對藥物成份的影響。應提供相關研究資料。”因此建立一種生產工藝過程中的熱原去除程度評價方法，該方法的建立對中藥注射劑現有活性炭處理和超濾工藝的合理性與科學性提供了一種評價方法，同時也為超濾技術在中藥注射劑制劑領域的應用提供一種評價方法。

目前細菌內毒素定量測定方法，比較成熟的方法為比濁法和比色法兩種，比色法靈敏度高，定量性和精度都高，通常在0.006～15EU/mL的范圍內進行定量，但是操作比較復雜。目前主要用在血液、體液中的微量內毒素測定方面。而比濁法操作簡單，經濟，靈敏度高，檢測范圍廣。通常在0.006～300EU/mL范圍內進行定量，但需要專用儀器，因該反應不能終止，所以測定誤差大。

目前，在實際的生產工藝控制與研究也均采用藥典提供的半定量方法——凝膠法，此方法不能定量不能對生產工藝中的除熱原效果進行評價。

動態比濁法在中藥注射劑成品質量控制也只是處于研究階段，動態比濁法則可以對細菌內毒素進行含量測定，能夠較準確的讀出樣品中的內毒素的含量，同時可以對自制細菌內毒素進行標定，解決商品細菌內毒素標樣示值較小（一般小于10000Eu）且價格較貴的問題，采用自制細菌內毒素使得工業化設備的內毒素挑戰性研究成為可能。如：李存玉等公布的《細菌內毒素定量法研究活性炭與超濾法熱原去除工藝》（醫藥導報，2010年02期：142-144頁），方法采用稀溶液進行試驗研究，與實際生產中的濃配溶液不相符，由于使用的是內毒素指示劑，難以實現內毒素大劑量挑戰，沒用規定評價中能夠最終保障熱原去徹底除的判斷標準，含量測定僅測定活性炭和超濾處理后的藥液，沒有同時平行測定處理前的污染藥液，污染藥液只是利用指示劑的標示值折算而得出，采用不同方法獲得兩組數據之間的可比性相對較差，其結果也并不能科學地評價去除熱原的效果。

發明內容

本發明的目的是為了解決現有中藥注射劑工藝中，除熱原方法不能明確或者除熱原效果不能科學合理的進行評價的問題，而提供了一種中藥注射劑中熱原去除工藝的評價方法。

本發明的一種中藥注射劑中熱原去除工藝的評價方法，是按照以下步驟進行的：

一、向經活性炭處理或超濾處理的中藥注射劑濃配藥液中，加入細菌內毒素混勻后，去除熱原；

二、對步驟一加入前與去除熱原后的細菌內毒素含量分別進行測定，以評價指標來判斷熱原去除效果，若評價指標達到或超過評價值，則認為所評價的工藝除熱原有效；

其中，所述的評價指標為細菌內毒素加入前與去除熱原后的含量下降倍數的對數值；

所述的評價值為：設備在空載加水運行狀態下，熱原去除倍數的log值不小于4，設備在負載加藥液運行狀態，熱原去除倍數的log值不小于3。

本發明包含以下有益效果：