[發明專利]一種耐鹽復合菌劑及其制備方法

在審

• 申請號: 201310207425.5
• 申請日: 2013-05-30
• 公開（公告）號: CN104212734A
• 公開（公告）日: 2014-12-17
• 發明（設計）人: 武鳳霞;鄧祖科;吳長春
• 申請（專利權）人: 北京世紀阿姆斯生物技術股份有限公司;北京世紀阿姆斯農業科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N11/14;C09K17/00;C12R1/125;C12R1/465;C09K101/00
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技術領域

本發明涉及微生物菌劑技術領域，尤其涉及一種耐鹽復合菌劑及其制備方法。

背景技術

隨著全球環境的惡化，土壤的沙漠化、鹽漬化問題日益威脅著人類賴以生存的有限的土地資源。農業是人類賴以生存的第一產業。在人口不斷增加，耕地日趨減少和淡水資源不足的嚴重壓力下，如何利用大面積的鹽堿地、荒漠化土地等資源發展農業，已成為生物科學迫切需要解決的重大課題。

目前，有關鹽漬土的開發利用主要采取兩種措施：一是通過工程措施來改良鹽漬土；二是開展生物治理，即通過農業生物技術培育耐鹽植物品種或開發利用有經濟價值的鹽生植物資源以改良鹽漬土。通過生物途徑使植物充分適應鹽漬環境，以提高植物在鹽漬土壤上的生產力是近年來國內外鹽漬土改良的新方向。

發明內容

本發明的目的是克服目前現有技術存在的不足，并針對鹽堿地施用微生物肥料資源相對較少的情況提供一種耐鹽復合菌劑，同時提供一種用來降低土壤鹽堿地對植物的毒害或提高植物耐鹽能力的耐鹽復合菌劑制備方法。

本發明的目的是通過以下技術方案來實現：

一種耐鹽復合菌劑，所述該菌劑由枯草芽孢桿菌和細黃鏈霉菌混合組成，所述枯草芽孢桿菌含有50～70份，所述細黃鏈霉菌含有30～50份，以上份數為質量份數。

一種耐鹽復合菌劑的制備方法，所述制備方法包括以下步驟：

(1)首先分別將枯草芽孢桿菌(Bacillus?subtilis)、細黃鏈霉菌(Streptomyces?microflavus)的菌種進行高密度培養，得到單菌體；

(2)然后將高密度培養得到的單菌體用載體吸附、制備成干燥的單一菌劑；以及

(3)最后將50～70份的枯草芽孢桿菌(Bacillus?subtilis)的單一菌劑與30～50份的細黃鏈霉菌(Streptomyces?microflavus)的單一菌劑混合得到耐鹽復合劑。

進一步的，步驟(2)中，所述載體包括草炭、蛭石及凹凸棒，所述草炭、蛭石及凹凸棒的質量比為1～5∶1～3∶0.2～0.5；所述單一菌劑中含有菌體為10～20％，以上百分比為質量百分比。

進一步的，所述枯草芽孢桿菌單一菌劑的制備方法包括以下步驟：

(1)將純化培養的斜面培養基上的枯草芽孢桿菌菌種接種至裝有體積比為15～30％的活化培養基的搖瓶中，在培養溫度為36～40℃，搖瓶轉速為150～200rpm的條件下，培養24～32小時，所述活化培養基包括15～20g/L的葡萄糖、10～15g/L的蛋白胨、3～7g/L的氯化鈉和0.3～0.8g/L的牛肉膏；

(2)將活化培養好的枯草芽孢桿菌菌種接種到裝有體積比為50～70％發酵培養基的發酵罐內，體積接種量為1～3％，在培養溫度為36℃～40℃，發酵罐攪拌轉速為200～220rpm的條件下，培養24～40小時，發酵罐中枯草芽孢桿菌的含量≥1×10⁹個/mL，所述發酵培養基包括10～15g/L的玉米粉、3～8g/L的葡萄糖、18～22g/L的豆餅粉、3～8g/L的魚粉、5～10g/L的碳酸鈣、0.8～1.0g/L的硫酸銨、0.1～0.5g/L的磷酸氫二鉀、0.1～0.3g/L的硫酸鎂和0.1～0.3g/L的硫酸錳。；以及

(3)將發酵得到的枯草芽孢桿菌單菌按質量百分比5～15％的比例經載體吸附得到單一菌劑。

進一步的，所述細黃鏈霉菌單一菌劑的制備方法包括以下步驟：

(1)將純化培養的斜面培養基上的細黃鏈霉菌菌種接種至裝有體積比為15～30％的活化培養基的搖瓶中，在pH為7.2-7.4，培養溫度為26～30℃，搖瓶轉速為150～200rpm的條件下，培養45～60小時，所述活化培養基包括20～25g/L的可溶性淀粉、1～1.5g/L的硝酸鉀、0.5～1.0g/L的氯化鈉、0.5～1.0g/L的磷酸氫二鉀、0.5～1.0g/L的硫酸鎂、0.01～0.05g/L的硫酸亞鐵和1L的水；

(2)將活化培養的細黃鏈霉菌菌種接種到裝有體積比為50～70％培養基的固體發酵罐內，接種量體積比為1～3％，在培養溫度為27℃～30℃的條件下，培養90～120天，發酵罐鏈霉菌的含量≥1×10⁸個/mL，所述發酵培養基包括30～40％的肥土、10～20％的干牛糞、3～5％的豆餅粉、5～10％的草炭、5～10％的麥麩、10～20％的花生殼粉、5～10％的玉米粉、2～5％的石灰，所述發酵培養基的pH為6.7-8.5，以上百分比為質量百分比；以及