[發(fā)明專(zhuān)利]一種醫(yī)用軟骨支架材料的制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310203720.3
• 申請(qǐng)日: 2013-05-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103301508A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-09-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙博;王振軍
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 北京博輝瑞進(jìn)生物科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): A61L27/36
• 分類(lèi)號(hào): A61L27/36;A61L27/56;A61L27/54
• 代理公司: 寧波市鄞州甬致專(zhuān)利代理事務(wù)所(普通合伙) 33228
• 代理人: 李迎春

1.一種醫(yī)用軟骨支架材料的制備方法，其特征在于包括以下操作步驟：

（1）軟骨組織的前置處理分離與初洗

取新鮮動(dòng)物的肋軟骨組織清洗潔凈，去除骨膜，切割成0.5~4cm厚的條形，使用注射用水沖洗3遍；

（2）病毒滅活

采用低濃度過(guò)氧乙酸-乙醇溶液法滅活病毒，該步驟在清洗槽可振蕩的恒溫超聲波清洗器中進(jìn)行，其中過(guò)氧乙酸的體積百分含量為0.05~0.2%，滅活時(shí)間為1~2h，溫度范圍為4~40℃；然后在磷酸鹽緩沖液中清洗2~5次，每次15min，檢測(cè)清洗后的磷酸鹽緩沖液的pH值，當(dāng)pH達(dá)到6.5-7.5后，以流動(dòng)的注射用水清洗材料，檢測(cè)電導(dǎo)率達(dá)到1.5um/s以下時(shí)終止；

（3）脫細(xì)胞

該步驟在清洗槽可振蕩的恒溫超聲波清洗器中進(jìn)行，首先將材料置入清洗槽中，在清洗槽中注入含有乙二胺四乙酸和氫氧化鈉的溶液，開(kāi)啟清洗器，清洗時(shí)間為5~30min，其中乙二胺四乙酸濃度為10~200mmol/L，氫氧化鈉溶液濃度為5~100mmol/L，然后關(guān)閉清洗器，將氫氧化鈉溶液傾出，注入磷酸鹽緩沖液，開(kāi)啟清洗器，清洗時(shí)間為0.5~24min，磷酸鹽緩沖液清洗重復(fù)2~5次，檢測(cè)清洗后的磷酸鹽緩沖液的pH值，當(dāng)pH達(dá)到6.5-7.5后，流動(dòng)的注射用水清洗材料，檢測(cè)電導(dǎo)率達(dá)到1.5um/s以下時(shí)終止；

（4）氯化鈉處理

該步驟在清洗槽可振蕩的恒溫超聲波清洗器中進(jìn)行，將氯化鈉溶液注入清洗槽中，開(kāi)啟清洗器，清洗時(shí)間為5~30min，氯化鈉溶液濃度為0.015mol/L或2mol/L、pH值不超過(guò)7.8，然后以流動(dòng)的注射用水清洗材料，檢測(cè)電導(dǎo)率達(dá)到1.5um/s以下時(shí)終止；

（5）成型

將材料放于冷凍干燥機(jī)中，按照預(yù)先設(shè)計(jì)的凍干流程進(jìn)行冷凍干燥：預(yù)凍至25~50℃，保溫0.5~4小時(shí)，升溫至15℃，保溫4~12小時(shí)，升溫15℃，保溫0.5~4小時(shí)，升溫至25℃，保溫4小時(shí)，凍干完成后，使用激光微孔打孔機(jī)打孔，孔徑范圍為0.05~1mm，孔間隔為0.1~10mm；

（6）包裝滅菌

在無(wú)菌的狀態(tài)下進(jìn)行包裝，一層采用特衛(wèi)強(qiáng)紙、另一層采用聚乙烯塑料，包裝完成后采用環(huán)氧乙烷進(jìn)行滅菌。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種醫(yī)用軟骨支架材料的制備方法，其特征在于：所述步驟（1）中的動(dòng)物為豬、牛、馬中的一種。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種醫(yī)用軟骨支架材料的制備方法，其特征在于：所述步驟（1）中的動(dòng)物為豬。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種醫(yī)用軟骨支架材料的制備方法，其特征在于：所述步驟（2）中過(guò)氧乙酸的體積百分含量為0.1%。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種醫(yī)用軟骨支架材料的制備方法，其特征在于：所述步驟（2）中滅活時(shí)間為1h。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種醫(yī)用軟骨支架材料的制備方法，其特征在于：所述步驟（3）中用含有乙二胺四乙酸和氫氧化鈉的溶液對(duì)材料進(jìn)行清洗的清洗時(shí)間為20min。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種醫(yī)用軟骨支架材料的制備方法，其特征在于：所述步驟（3）中乙二胺四乙酸濃度為50~100mmol/L。

8..根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種醫(yī)用軟骨支架材料的制備方法，其特征在于：所述步驟（3）中乙二胺四乙酸濃度為100mmol/L。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種醫(yī)用軟骨支架材料的制備方法，其特征在于：所述步驟（3）中氫氧化鈉濃度為5~20mmol/L。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的一種醫(yī)用軟骨支架材料的制備方法，其特征在于：所述步驟（3）中氫氧化鈉濃度為10mmol/L。

11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種醫(yī)用軟骨支架材料的制備方法，其特征在于：所述步驟（3）中用磷酸鹽緩沖液對(duì)材料進(jìn)行清洗的清洗時(shí)間為1~12min。

12.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種醫(yī)用軟骨支架材料的制備方法，其特征在于：所述步驟（4）中氯化鈉溶液清洗時(shí)間為20min。

13.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種醫(yī)用軟骨支架材料的制備方法，其特征在于：所述步驟（4）中氯化鈉溶液濃度為0.015mol/L。