[發明專利]檢測microRNA-122的試劑盒及方法有效
| 申請號： | 201310192187.5 | 申請日： | 2013-08-27 |
| 公開（公告）號： | CN103361420A | 公開（公告）日： | 2013-10-23 |
| 發明（設計）人： | 夏涵;梁盼盼;黃慶;府偉靈 | 申請（專利權）人： | 中國人民解放軍第三軍醫大學第一附屬醫院 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京海虹嘉誠知識產權代理有限公司 11129 | 代理人： | 謝殿武 |
| 地址： | 400038 重*** | 國省代碼： | 重慶;85 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 檢測 microrna 122 試劑盒 方法 | ||
1.一種試劑盒，包括如下結構的兩條探針，?
所述非對稱發夾探針1，包括回文序列C、兩條莖臂B和b、以及連接于莖臂B上的粘性末端A，所述兩條莖臂B和b連接于回文序列C的兩端且具有互補的核酸序列，所述回文序列C為無關序列，所述莖臂B與其連接的粘性末端A具有靶序列的互補核酸序列；?
所述非對稱發夾探針2，包括回文序列a、兩條莖臂B和b、和連接于莖臂B上的粘性末端c，所述兩條莖臂B和b連接于回文序列a的兩端且具有互補的核酸序列，所述回文序列a與其相連的一條莖臂b具有靶序列，粘性末端c具有和非對稱發夾探針1中所述的無關序列C互補的核酸序列；?
所述microRNA-122的靶序列為：?
ACUGGAGUGUGACAAUGGUGUUUG。?
2.根據權利要求1所述的試劑盒，?
所述非對稱發夾探針1的核苷酸序列為：?
CAAACACCATTGTCACACTCCAGTCAAAGTACTGGAGTGTGACAATGG，?
所述非對稱發夾探針2的核苷酸序列為：?
ACTGGAGTGTGACAATGGTGTTTGCCATTGTCACACTCCAGTACTTTG。?
3.一種雜交鏈反應體系，包括權利要求1或2中的非對稱發夾探針1和非對稱發夾探針2。?
4.根據權利要求3所述的雜交鏈反應體系，還包括權利要求1或2中的待測microRNA-122的靶序列。?
5.一種檢測microRNA-122方法，包括以下步驟：?
（1）將權利要求1或2中的非對稱發夾探針1和非對稱發夾探針2以及待測microRNA-122的靶序列加入到雜交鏈反應體系中進行反應，得到反應產物；?
（2）對所述步驟（1）得到的反應產物進行電泳檢測。
6.根據權利要求5所述的方法，其反應時的條件為99℃，8分鐘；50℃，1小時。?
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