[發明專利]一種胸腺五肽的液相合成方法

無效

• 申請號: 201310191867.5
• 申請日: 2013-05-22
• 公開（公告）號: CN103819539A
• 公開（公告）日: 2014-05-28
• 發明（設計）人: 周蘭霞;李續
• 申請（專利權）人: 蘭州大學第一醫院
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K1/20;C07K1/06;C07K1/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種胸腺五肽液相合成法，其特征在于，該方法包括以下步驟：

(1)?以Boc-Tyr-OH為起始原料，其羧基和酚羥基被Bzl芐基保護，在酸性條件下，脫去Boc保護基團，經沉淀得到NH₂-Tyr(Bzl)-OBzl鹽酸鹽；

(2)?在堿性條件下，使(1)中得到的NH₂-Tyr(Bzl)-OBzl鹽酸鹽和Boc-Val-OH在縮合劑作用下反應，經過酸堿洗脫除水干燥，得到Boc-Val-Tyr(Bzl)-OBzl二肽；

(3)?脫去(2)中得到的二肽氨端保護基，然后沉淀得到的產物與Boc-Asp(OBzl)-OH在堿性條件下，經縮合劑作用反應，經過酸堿洗脫除水干燥，得到Boc-Asp(OBzl)-Val-Tyr?(Bzl)-OBzl三肽；

(4)?脫去(3)中得到的三肽氨端保護基，然后得到的產物與Fmoc-Lys(Boc)-OH在縮合劑作用下反應，經過酸堿洗脫除水干燥，然后沉淀得到Fmoc-Lys(Boc)-Asp(OBzl)-Val-?Tyr(Bzl)-OBzl四肽；

(5)?在堿性條件下脫去(4)中得到的四肽氨端保護基團，然后與Boc-Arg(pbf)-OH在堿性條件下，經縮合劑作用反應，經過酸堿洗脫除水干燥，然后沉淀得到Boc-Arg(pbf)-?Lys(Boc)-Asp(OBzl)-Val-Tyr(Bzl)-OBzl保護五肽；

(6)?將(5)中得到的五肽利用酸解法，脫除全部保護基團，沉淀得到NH₂-Arg-Lys-Asp?-Val-Tyr-OH五肽粗品。

2.根據權利要求1所述的胸腺五肽液相合成方法，其特征在于步驟(1)中，所述的對Boc-Tyr-OH的羧基和酚羥基進行Bzl芐基保護，則是在碳酸鉀和四丁基碘化銨存在下，經芐溴處理而得到的。

3.根據權利要求1所述的胸腺五肽液相合成方法，其特征在于步驟(1)、(3)、(4)中，所述的在酸性條件下脫去Boc保護基團，為乙酸乙酯溶液中通入HCl氣體，或者使用20-60%?TFA/DCM溶液。

4.根據權利要求1所述的胸腺五肽液相合成方法，其特征在于(2)、(3)、(4)、(5)中用DIEA/N-甲基嗎啉/三乙胺等有機堿將PH調至8~9。

5.根據權利要求1所述的胸腺五肽液相合成方法，其特征在于(2)、(3)、(4)、(5)中肽縮合步驟采用DCC/HOBT、HBTU、HOAT、HATU、DIC或PyBOP為縮合劑。

6.根據權利要求1所述的胸腺五肽液相合成方法，其特征在于(2)、(3)、(4)、(5)中所述的酸堿洗脫是將經過偶聯得到的肽溶液用檸檬酸溶液、飽和碳酸氫鈉溶液、飽和氯化鈉溶液萃取；所說的除水干燥是將反應液用硫酸鈉/鎂等干燥，然后減壓蒸餾除去有機溶劑。

7.根據權利要求1所述的胸腺五肽液相合成方法，其特征在于步驟(5)中，Fmoc基團是在二乙胺/哌啶提供的堿性條件下脫去的。

8.根據權利要求1所述的胸腺五肽液相合成方法，其特征在于步驟(6)中，酸解脫除是指加入三氟乙酸、三氟甲磺酸、苯甲硫醚將保護基團全部脫除。

9.根據權利要求1所述的胸腺五肽液相合成方法，其特征在于步驟(1)、(3)、(4)、(5)、(6)中沉淀是指加入乙醚/石油醚/甲基叔丁基醚。

10.根據權利要求1所述的胸腺五肽液相合成方法，其特征在于步驟(6)中，得到的五肽粗品還要經C18/C8反相柱除雜，得到純化產物。