[發明專利]一種快速檢測水體中沙門氏菌濃度的方法

有效

• 申請號: 201310188135.0
• 申請日: 2013-05-21
• 公開（公告）號: CN103278543A
• 公開（公告）日: 2013-09-04
• 發明（設計）人: 呂保櫻;唐艷平
• 申請（專利權）人: 桂林市產品質量監督檢驗所
• 主分類號: G01N27/26
• 分類號: G01N27/26
• 代理公司: 桂林市持衡專利商標事務所有限公司 45107
• 代理人: 唐智芳

1.一種快速檢測水體中沙門氏菌濃度的方法，其特征在于包括以下步驟：

1)獲得多份不同已知濃度的沙門氏菌溶液；

2)確定沙門氏菌與摻硼金剛石膜電極響應電流的依從關系

采用CHI660D電化學工作站用電化學計時電流的方法快速檢測沙門氏菌的濃度，以摻硼金剛石膜電極為工作電極，鉑絲電極為對電極，飽和甘汞電極為參比電極，設置工作電極的檢測電位為0.9～1.15V，電解池中為pH7.2～7.6的磷酸-磷酸鹽緩沖溶液；將上述步驟1)獲得的多份沙門氏菌溶液逐一進樣，記錄每次進樣時摻硼金剛石膜電極的響應電泳的電流值，根據全部進樣的沙門氏菌液濃度和與其對應響應電流的電流值作曲線，得到響應電流-沙門氏菌濃度曲線，該曲線為一直線，確定沙門氏菌與摻硼金剛石膜電極響應電流的依從關系為線性關系；

3)沙門氏菌濃度的快速檢測

3.1)按步驟2)中的檢測條件，將待測水體樣品進樣，記錄摻硼金剛石膜電極的響應電泳的電流值；

3.2)利用步驟2)確定的響應電流-沙門氏菌濃度曲線，結合上述步驟3.1)記錄的電流值讀出該電流值對應的沙門氏菌濃度，該濃度即為待測水體的沙門氏菌濃度。

2.根據權利要求1所述的快速檢測水體中沙門氏菌濃度的方法，其特征在于：步驟2)中，所述工作電極的檢測電位為0.95～1.05V，電解池中為pH7.3～7.5的磷酸-磷酸鹽緩沖溶液。

3.根據權利要求1所述的快速檢測水體中沙門氏菌濃度的方法，其特征在于：步驟2)中，所述工作電極的檢測電位為1.0V，電解池中為pH7.4的磷酸-磷酸鹽緩沖溶液。

4.根據權利要求1～3中任一項所述的快速檢測水體中沙門氏菌濃度的方法，其特征在于：步驟1)中，獲得多份不同已知濃度的沙門氏菌溶液的具體操作為：取沙門氏菌菌液用無菌生理鹽水稀釋，分多次取適量稀釋液分別注入到多個培養瓶中，計算各培養瓶中沙門氏菌的菌落數，得到多份不同已知濃度的沙門氏菌溶液。

5.根據權利要求4所述的快速檢測水體中沙門氏菌濃度的方法，其特征在于：步驟1)中，獲得多份不同已知濃度的沙門氏菌溶液的具體操作為：取沙門氏菌菌液用無菌生理鹽水稀釋，分多次取適量稀釋液分別注入到多個培養瓶中，將各個培養瓶中稀釋液分別涂布于LB平板上，于35～37℃培養箱中培養24h,通過計算各個LB平板上沙門氏菌的菌落數獲得各培養瓶中沙門氏菌的菌落數，從而得到多份不同已知濃度的沙門氏菌溶液。

6.根據權利要求1～3中任一項所述的快速檢測水體中沙門氏菌濃度的方法，其特征在于：所述的響應電流-沙門氏菌濃度曲線用于擬合表達摻硼金剛石膜電極的響應電流與沙門氏菌濃度依從關系的公式，擬合得到的公式為ΔI＝Kx，其中ΔI為計時電流變化，單位為μA，K為常數，x為沙門氏菌濃度，單位為cfu/mL。