[發(fā)明專利]一種利用金納米粒子和碲化鎘量子點的熒光內(nèi)濾效應檢測蔬菜中氨基甲酸酯類農(nóng)藥的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310185003.2
• 申請日: 2013-05-08
• 公開（公告）號: CN103364379A
• 公開（公告）日: 2013-10-23
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 孫春燕;郭佳佳;李宏坤;張民偉;曹先一;羅葉麗;沈斐
• 申請（專利權(quán)）人: 吉林大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;G01N21/33
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種利用金納米粒子(AuNPs)和碲化鎘(CdTe)量子點的熒光內(nèi)濾效應檢測蔬菜中氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的方法，其特征在于利用AuNPs對CdTe量子點的熒光猝滅作用方法檢測蔬菜中氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留量，包括以下步驟：CdTe量子點的合成和純化；AuNPs的制備；通過測定熒光光譜圖觀察CdTe量子點與AuNPs的熒光內(nèi)濾作用；通過測定熒光光譜圖觀察CdTe量子點、金納米粒子、底物(ATI)和酶(AChE)體系的反應；運用AuNPs對CdTe量子點的熒光猝滅作用方法檢測氨基甲酸酯類農(nóng)藥并進行實際樣品的檢測。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述CdTe量子點的制備步驟如下：

首先稱量0.0256g?Te粉和0.0386g?NaBH4加入到三口燒瓶中，用高純水配制pH＝11的NaOH溶液100mL，向其中通入10min?N₂，裝于一恒壓滴定漏斗①中，用高純水配制濃度為4×10^-3mol/L的CdCl₂溶液100mL，加入67μL?TGA，用1mol/L的NaOH溶液調(diào)節(jié)pH＝11，向其中通入10min?N₂，將得到的澄清透明溶液裝于另一恒壓滴定漏斗②中，將整個裝置與真空、N₂系統(tǒng)連接起來，經(jīng)歷幾次抽真空和通N₂的步驟除去體系中的O₂；略微加熱，打開漏斗①，加入3～5滴水，電磁攪拌，引發(fā)反應，待Te粉基本反應完全后(溶液為紅色并且黑色粉末消失)，將①中的水全部加入，得到透明淺紅色溶液，再將②中溶液全部加入，整個過程都進行N₂保護；溶液全部加入后繼續(xù)攪拌10min，撤去N₂保護，將得到的混合溶液用50％的微波功率輸出加熱進行晶體生長反應；得到的產(chǎn)物加入等體積的異丙醇洗滌，并離心除去過量前體，最后將其再分散在200mL的純凈水中。

3.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述AuNPs的制備和透射電鏡表征步驟如下：

所有的玻璃器皿都經(jīng)過王水浸泡，雙蒸水清洗，晾干備用，配制試劑所用蒸餾水需通過0.45μm的濾膜過濾；制備時，向潔凈的三口燒瓶中加入1mmol/L的氯金酸50mL，在攪拌的情況下使其沸騰，緊接著快速加入38.8mmol/L的檸檬酸三鈉5mL，邊加熱邊攪拌，溶液由淡黃色變成酒紅色，反應持續(xù)10分鐘，停止加熱，溶液冷卻至室溫后，用0.45μm的微孔膜過濾，4℃保藏，所制得的AuNPs粒徑為13nm。

①樣品制備

吸取13nm?AuNPs180μL，娃哈哈純凈水720μL，含有15μM碘化乙酰硫代膽堿(ATI)的PBS(10mM，pH＝8.0)100μL，500mU/mL的乙酰膽堿酯酶10μL于2mL離心管中，作為對照，另一離心管中不加底物和乙酰膽堿酯酶，在25℃下同時培養(yǎng)10min；將兩種樣品分別滴于兩個銅網(wǎng)上，室溫晾干備用。

②參數(shù)

用TECNAI?F20透射電鏡于200kV的加速電壓下掃描樣品①的透射電鏡。

4.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述通過測定熒光吸收光譜觀察CdTe量子點與AuNPs的熒光內(nèi)濾作用的步驟如下：

在六個離心管(2.0mL)中分別依次加入CdTe量子點1mL，13nm?AuNPs(1，0.9，0.8，0.7，0.6，0.5，0.4，0.3，0.2，0.1，0mL)，娃哈哈純凈水(0.72，0.82，0.92，1.02，1.12，1.22，1.32，1.42，1.52，1.62，1.72mL)，測熒光光譜圖。

5.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述通過測定熒光光譜圖觀察CdTe量子點、金納米粒子、底物和酶體系的反應的步驟如下：

在四個試管(2.0mL)中分別依次加入CdTe量子點1mL，13nm的AuNPs1mL，娃哈哈純凈水0.5mL，含有20μM碘化乙酰硫代膽堿的磷酸鹽緩沖液(PBS，10mM，pH＝8.0)200μL，再依次加入不同濃度的AChE(200，400，600，800，1000，1200，1500mU/mL)20μL，然后將混合物在25℃下培養(yǎng)5min，測熒光吸收光譜。