[發(fā)明專利]一種用于組織培養(yǎng)楝樹幼苗的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310177348.3
• 申請(qǐng)日: 2013-05-14
• 公開（公告）號(hào): CN103299902A
• 公開（公告）日: 2013-09-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王臺(tái)虎
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 王臺(tái)虎
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 南京中新達(dá)專利代理有限公司 32226
• 代理人: 陳偉;朱杰

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種用于楝樹組織培養(yǎng)的方法，特別涉及一種用于組織培養(yǎng)楝樹幼苗的方法。?

背景技術(shù)

楝樹的用途很多，印楝素是從印度楝中提取出來的一種化學(xué)物質(zhì)，是生產(chǎn)生物農(nóng)藥的有效成分。楝樹的果實(shí)中富含不飽和脂肪酸，占干果總重量的20％，其榨出來的油脂可以作為生物柴油使用，亦可作為生產(chǎn)化工用品的原料。果實(shí)榨過油之后的渣滓可以用來作為化肥使用。楝樹的葉子可以泡茶飲用，在東南亞國家以及日本，都有飲用楝樹葉茶的習(xí)慣。楝樹的木質(zhì)結(jié)實(shí)，可以作為家具的材料，具有極高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。除此之外，楝樹具有極高的環(huán)境價(jià)值，可以凈化空氣，吸收有害氣體。楝樹可以釋放揮發(fā)性化學(xué)成分，驅(qū)趕蚊蟲和殺死細(xì)菌，是城市綠化的重要樹種。?

楝樹的育苗方法主要有播種、插根、插芽等，楝樹的種植通常以播種育苗為主。播種育苗有以下缺點(diǎn)：?

種子繁殖變異性大，不能有效地保持母本優(yōu)良性狀，受季節(jié)限制，一年只能育苗一次，播種前的種子處理復(fù)雜，種子的前期處理復(fù)雜，中間的影響環(huán)節(jié)多，每個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)種子的發(fā)芽率都產(chǎn)生或多或少的影響，發(fā)芽所需的時(shí)間長，間苗難，成活率低，田間工作量大，育苗空間需要大，種子發(fā)芽后直接在外界生長，易被細(xì)菌、霉菌感染，增加染病機(jī)率，引發(fā)病蟲害，降低幼苗的成活率。因此播種育苗不具有產(chǎn)業(yè)化的優(yōu)勢(shì)。?

組織培養(yǎng)育苗的優(yōu)點(diǎn)：?

變異可能小，有利于保持母本的優(yōu)良性狀，用材少，不受氣候、季節(jié)、基質(zhì)等自然條件的影響；解決常規(guī)育苗困難的問題，繁殖周期短，繁殖系數(shù)大，可大批量生產(chǎn)；培育脫毒苗，使植物減少微生物侵害。因此大規(guī)模種植楝樹的最佳方式是進(jìn)行組織培養(yǎng)。?

在本發(fā)明之前，楝樹育苗的方式主要是育種育苗。育種育苗方法受季節(jié)、氣候與場(chǎng)地的限制，產(chǎn)量低、無法產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。目前所有的組織培養(yǎng)方法還沒有針對(duì)楝樹的培養(yǎng)基，因此無法培養(yǎng)出楝樹本植物幼苗；已有的能夠?qū)崿F(xiàn)的培養(yǎng)木本?植物，例如茶樹的組織培養(yǎng)，以及樹莓苗木組織培養(yǎng)，紅豆杉種苗培養(yǎng)方法等。但由于成活率的原因，這些組織培養(yǎng)的方法都不能用于楝樹的組織培養(yǎng)。例如：試驗(yàn)表明，用于茶樹組織培養(yǎng)方法在誘導(dǎo)在初代培養(yǎng)楝樹外植體的時(shí)候會(huì)產(chǎn)生大量的死苗，其死亡比例高達(dá)87％；而紅豆杉種苗雖然在初代培養(yǎng)上效果略微好于茶樹組織培養(yǎng)方法，但其在誘導(dǎo)愈傷組織過程中成功率低，時(shí)間長，不具備實(shí)用性。?

因此，如何解決在保證樹種遺傳特性的基礎(chǔ)上進(jìn)行快速繁殖，從而提供大量廉價(jià)的楝樹樹苗，成為楝樹產(chǎn)業(yè)的首要而迫切的問題。?

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的就是克服上述缺陷，提供一種用于組織培養(yǎng)楝樹幼苗的方法。?

本發(fā)明的技術(shù)方案是：?

一種用于組織培養(yǎng)楝樹幼苗的方法，其特征在于步驟如下：?

(1)采集外殖體：剪下枝梢半木質(zhì)化部分；?

(2)外殖體消毒：在無菌的狀態(tài)下，用消毒試劑進(jìn)行消毒；所述消毒試劑成分為0.1％～0.2％高錳酸鉀m/v，10％～20％次氯酸鈉溶液v/v，1mL/100mL吐溫水，無菌水，1mL/50mL山農(nóng)一號(hào)I型水，50mg/L鏈霉素、50mg/L頭孢霉素、50mg/L制霉菌素，二甲基亞砜；?

(3)初代培養(yǎng)：將外殖體轉(zhuǎn)接到初代培養(yǎng)基中培養(yǎng)2-3個(gè)月；所述培養(yǎng)基為MS基本培養(yǎng)基添加蔗糖20～60g，椰子汁20～100ml，活性炭0.5～2g，細(xì)胞分裂素噻重氮苯基脲0.1～0.5mg，山農(nóng)1號(hào)II型1～4mL，卡拉膠3～10g，水至1升，調(diào)節(jié)pH至5.8～6.2；?

(4)誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織：將外殖體轉(zhuǎn)接到新的愈傷組織的培養(yǎng)基中；所述培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基中添加蔗糖20～100g，椰子汁20～100ml，6-(N-芐基)氨基嘌呤0.5～2mg，萘乙酸0.005～0.02mg，卡拉膠3～10g，水至1升，調(diào)整pH至5.8～6.2；?

(5)利用愈傷組織誘導(dǎo)不定芽：將愈傷組織放入培養(yǎng)基中誘導(dǎo)不定芽；所述培養(yǎng)基是在正常的MS培養(yǎng)基中加入蔗糖(20～100)g，椰子汁20～100ml，6-(N-芐基)氨基嘌呤0.2～1mg，萘乙酸0.05～0.2mg，卡拉膠3～10g，水至1升，調(diào)節(jié)pH到5.8～6.2；?

(6)增殖培養(yǎng)：轉(zhuǎn)接一次到增殖培養(yǎng)基中；所述增殖培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基中加入蔗糖20～100g，椰子汁50～200ml，6-(N-芐基)氨基嘌呤0.2～1mg，萘乙酸0.05～0.2mg，卡拉膠3～10g，水至1升，調(diào)節(jié)pH至5.8～6.2；?