[發(fā)明專利]一種食品中過(guò)敏原的體外檢測(cè)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310169148.3
• 申請(qǐng)日: 2013-05-09
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103257237A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-08-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 車會(huì)蓮;孫娜;周催;王靜;王翠燕;賀曉云;黃昆侖
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68
• 代理公司: 北京路浩知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002
• 代理人: 王朋飛

1.一種食品中過(guò)敏原的體外檢測(cè)方法，包括以下步驟：

1）以過(guò)敏原免疫小鼠，建立IgE高反應(yīng)性食品過(guò)敏動(dòng)物模型；

2）致敏RBL-2H3細(xì)胞，過(guò)敏原或大鼠抗小鼠IgE抗體激發(fā)，檢測(cè)β-氨基己糖苷酶的釋放率。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述小鼠為SPF級(jí)的3～4周齡雌性BALB/c小鼠。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，步驟1）中所述過(guò)敏原以霍亂毒素為佐劑。

4.根據(jù)權(quán)利要求4所述的檢測(cè)方法，其特征在于，每1mg劑量的過(guò)敏原吸附于10μg霍亂毒素佐劑。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，步驟2）中以抗過(guò)敏原小鼠血清致敏RBL-2H3細(xì)胞。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述抗過(guò)敏原小鼠血清稀釋到含有80～120ng/ml總IgE抗體的血清。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，步驟2）中所述過(guò)敏原濃度為10～100ng/ml；所述大鼠抗小鼠IgE抗體濃度為5～10μg/ml。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，步驟2）中所述激發(fā)時(shí)間為45～60min。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，過(guò)敏原生物活性=1/ED50，其中，ED50為達(dá)到β-氨基己糖苷酶最大釋放率一半的過(guò)敏原溶液的濃度。