[發明專利]一種高通量全基因組DNA甲基化檢測技術

無效

• 申請號: 201310163085.0
• 申請日: 2013-05-06
• 公開（公告）號: CN103233072A
• 公開（公告）日: 2013-08-07
• 發明（設計）人: 王師;呂佳;包振民;張玲玲;胡曉麗;陸維
• 申請（專利權）人: 中國海洋大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 青島海昊知識產權事務所有限公司 37201
• 代理人: 曾慶國

1.一種全基因組DNA甲基化檢測方法，包括如下的步驟：

1）將基因組DNA用內切酶FspEI酶進行酶切，獲得酶切片段；

2）將酶切片段的兩端分別連接上接頭，作為擴增引物的結合點；

3）將連接上接頭的酶切片段用引物進行第一輪PCR擴增，從而富集接頭連接正確的酶切片段；

4）將第一輪PCR擴增產物經凝膠純化后用引物進行第二輪PCR擴增，引入Barcode來構建測序文庫；

5）測序文庫進行測序；將測序數據進行分析得到全基因組甲基化信息。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述的步驟2）中的接頭，為接頭slx1和slx2，其中構成slx1的兩個核苷酸片段，其序列分別為SEQ?ID?NO:1和SEQ?ID?NO:2；

構成slx2的兩個核苷酸片段，其序列分別為SEQ?ID?NO:3和SEQ?ID?NO:2。

3.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述的步驟3）中的引物的核苷酸序列分別為SEQ?ID?NO:4和SEQ?ID?NO:5。

4.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述的步驟4）中的引物的核苷酸序列分別為SEQ?ID?NO:4和SEQ?ID?NO:6。