[發明專利]一株強毒遲緩愛德華氏菌疫苗株及其應用

有效

• 申請號: 201310159240.1
• 申請日: 2013-05-03
• 公開（公告）號: CN103255089A
• 公開（公告）日: 2013-08-21
• 發明（設計）人: 黃倢;謝國駟;王秀華;隋虎辰;楊春志;邊慧慧;史成銀;張慶利;許華;劉莉
• 申請（專利權）人: 中國水產科學研究院黃海水產研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A61K39/02;A61P31/04;C12R1/01
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技術領域

本發明涉水產養殖動物的微生物學及免疫學領域，具體涉及一株遲緩愛德華氏菌(Edwardsiella?tarda)菌株1101及其應用。

背景技術

遲緩愛德華氏菌(Edwardsiella?tarda)由Hoshina(1962)首次從鰻鱺(Anguilla?japanica)中分離，是革蘭氏陰性短桿菌，菌體大小約1μm(直徑)×2-3μm(長度)，兼性厭氧，與鲇魚愛德華氏菌(E.ictaluri)和保科愛德華氏菌(E.hoshinae)同屬于腸桿菌科愛德華氏菌屬。遲緩愛德華氏菌對多種魚類具有致病性，已報道可感染的魚類有：斑點叉尾鮰(Ictalurus?punctatus)、大口黑鱸(Micropterus?salmoides)、鰻鱺(A.japonica)、鯔魚(Mugil?cephalus)、犁齒鯛(Evynnis?japonica)、羅非魚(Tilapia?nilotica)、奇努克鮭魚(Oncorhynchus?tshawytscha)、紅鯛(Chrysophrys?major)、五條魳(Seriola?quinqueradiata)、牙鲆(Paralichthys?olivaceus)、鯉魚(Cyprinus?carpio)、海鱸(Morone?saxatilis)、大菱鲆(Scophthalmus?maximus)、胡鯰(Clarias?batrachus)、錦鯉(Anabas?testudineus)、歐洲鰻(Anguilla?anguilla)、黃顙魚(Pelteobagrus?fulvidraco)、絲足魚(Trichogaster?trichopterus)、地圖魚(Astronotus?ocellatus)、劍尾魚(Xiphophorushelleri)和斑馬魚(Danio?rerio)等。該菌株另也有感染兩棲類(蟾蜍、牛蛙等)、爬行類(蜥蜴、蛇、海龜、中華鱉等)、鳥類(企鵝、禿鷹、鴕鳥及一些水鳥等)、哺乳類(海獅、海牛、豬、狗、牛、猴子等)的報道。除以上動物外，該菌株可感染人類，引起人的腸胃炎、流行性腹瀉和敗血癥等癥狀。該菌呈世界性分布，普遍存在于淡水和海水環境中，主要分布在中國、澳大利亞、日本、印度、以色列、馬來群島、美國、巴拿馬等熱帶和亞熱帶國家和地區，該菌是當前水產養殖業中的有著極大危害的病原菌之一。以往采用抗生素和化學藥物等方法進行預防或治療，會帶來諸多問題，如病原的耐藥性、藥物殘留、食品安全及環境污染等問題。近年來，通過發展疫苗免疫技術為基礎的綜合防控技術體系來達到病害控制已被許多國家認可。

相對其他常規致病細菌，遲緩愛德華氏菌具有以下兩個特點。首先，遲緩愛德華氏菌菌株的血清型眾多，且目前對該病原的血清分型尚沒有統一標準。Sakazaki(1967)等對256株遲緩愛德華氏菌的抗原結構進行了分析，認定有17個O抗原群和11個H抗原群。Park(1983)等對從鰻魚中分離的445株遲緩愛德華氏菌進行了O抗原凝集分析，其中有270株被認為屬于不同4個血清群，即A、B、C、D四個血清型，其中主要從腎臟中分離所得的血清型A的致病力最強。此外，遲緩愛德華氏菌是一種胞內寄生菌，已有報道證實該病原可在機體的上皮及巨噬細胞等細胞中生長并繁殖，具有多種逃避機體的免疫殺傷的性能(Janda等，1991和1995；Strauss等，1997等；Ling等，2000；Rao等，2001；Okuda等，2006)。以上兩點，給該病原疫苗開發帶來了一定的困難，但多年來，科技工作者仍然做了大量的工作進行遲緩愛德華氏菌不同種類的疫苗的研究嘗試，并取得了一定的成果。

上世紀90年代以來，國內外就開展了許多遲緩愛德華氏菌疫苗的研究工作，不同學者采用各自分離的遲緩愛德華氏菌菌株制備的滅活疫苗所產生的免疫保護力存在相當大的差異。Gutierrez和Miyazaki(1994)用福爾馬林滅活的遲緩愛德華氏菌SH-89133菌株注射免疫日本鰻的相對保護率(RPS)僅為12.5-25％；Sun等(2011)報道用遲緩愛德華氏菌TX1菌株的福爾馬林滅活疫苗免疫牙鲆的RPS只有33.3％；Hossain等(2011)進行多種滅活方法制備遲緩愛德華氏菌V-1菌株的免疫原性的比較，其中采用福爾馬林滅活疫苗通過腹腔注射日本鰻后，其RPS為56％。