[發明專利]一株強毒遲緩愛德華氏菌疫苗株及其應用

有效

• 申請號: 201310159240.1
• 申請日: 2013-05-03
• 公開（公告）號: CN103255089A
• 公開（公告）日: 2013-08-21
• 發明（設計）人: 黃倢;謝國駟;王秀華;隋虎辰;楊春志;邊慧慧;史成銀;張慶利;許華;劉莉
• 申請（專利權）人: 中國水產科學研究院黃海水產研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A61K39/02;A61P31/04;C12R1/01
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一株遲緩愛德華氏菌菌株1101，其特征是所述菌株為分離自海水養殖魚類的野生菌株遲緩愛德華氏菌菌株1101，其保藏編號為：CGMCC?No.7197。

2.如權利要求1所述的遲緩愛德華氏菌菌株1101，其特征在于所述菌株的16s?rRNA、EsrB、H1yB基因上游堿基序列和16s-23s?rRNA區間堿基序列如SEQ?ID?NO：1、SEQ?ID?NO：2、SEQ?ID?NO：3和SEQ?ID?NO：4所示，這些基因具有該菌株的特征性。

3.如權利要求1所述的遲緩愛德華氏菌菌株1101，其特征在于所述菌株對海淡水魚類具有較強的致病性，注射攻毒的半數致死量在1.0×10²-9.9×10³CFU/g的范圍。

4.如權利要求1所述的遲緩愛德華氏菌菌株1101，其特征是該菌株可培養于LB、TSB或2216E培養基，培養方法如下：從保存的菌種中挑取少量劃線于上述培養基的固體平板，培養溫度范圍為28-37℃，在2216E瓊脂平板中，28℃培養48h后可形成直徑小于0.5mm的白色細小菌落；在TSB和LB瓊脂平板中，37℃培養36h后可形成直徑約0.5mm的微黃色圓形菌落，將單菌落接種于上述培養基的培養液中，28-37℃，180r/min搖瓶培養至OD₆₀₀為0.5-0.6獲得該菌株的新鮮菌液。

5.權利要求1所述的遲緩愛德華氏菌菌株1101的應用，其特征是該菌株的抗原包含針對愛德華氏菌保護性抗原，該保護性抗原具有良好的免疫原性和高度保守性，用該菌株制備的抗原經免疫接種后對愛德華氏菌感染具有良好的免疫保護作用，該菌株適用于生產愛德華氏菌的疫苗。

6.權利要求5所述的遲緩愛德華氏菌菌株1101的應用，其特征在于所述的抗原的制備方法包括滅活菌體、菌蛻成分、減毒菌株、保護性抗原、抗原亞單位、抗原決定簇或抗原基因表達載體的表達產物的任何一種或一種以上。

7.權利要求5所述的遲緩愛德華氏菌菌株1101的應用，其特征在于生產的疫苗可以是使用該菌株制備的抗原的單一成分，也可以使用該菌株制備的抗原與其他細菌的抗原混合生產聯合疫苗，也可以將制備的單一或聯合疫苗的抗原添加佐劑生產疫苗。

8.權利要求5所述的遲緩愛德華氏菌菌株1101的應用，其特征在于所生產的疫苗采用注射免疫、創傷免疫、浸浴免疫和口服免疫等免疫接種方式。

9.如權利要求7所述的遲緩愛德華氏菌菌株1101的應用，其特征在于所生產的滅活疫苗注射免疫接種時，可采用腹腔或肌肉注射兩種方式，使用的劑量為10⁴-10⁸CFU/g；創傷免疫或浸浴免疫接種時，浸泡水體中滅活疫苗的濃度為10⁵-10⁹CFU/mL，浸泡時間2-60min；口服免疫接種時，滅活疫苗可添加于配合飼料中，配合飼料中的10⁵一10¹⁰CFU/g，連續投喂14-30天。

10.權利要求1所述的遲緩愛德華氏菌株1101在制備預防愛德華氏菌感染的藥物中的應用，所述藥物免疫接種的對象包括海水養殖魚類、半咸水養殖魚類、洄游魚類、淡水養殖魚類、觀賞魚類、淡水養殖的兩棲類和爬行類。