[發明專利]熒光及熱/pH敏感的有機-無機復合微球載體的制備方法

有效

• 申請號: 201310158984.1
• 申請日: 2013-05-02
• 公開（公告）號: CN103239410A
• 公開（公告）日: 2013-08-14
• 發明（設計）人: 萬錒俊;桂日軍;李慧麗;金輝
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: A61K9/16
• 分類號: A61K9/16;A61K47/36;A61K47/04;A61K31/704;A61P35/00;A61P31/00
• 代理公司: 上海科盛知識產權代理有限公司 31225
• 代理人: 蔣亮珠

技術領域

本發明屬于藥物載體材料領域，具體涉及一種新型熒光及熱/pH敏感的有機-無機復合微球載體的制備方法。

背景技術

癌癥是目前人類死亡的首要原因之一，每年約有一千多萬新增病人遭受其害。癌癥治療方法主要包括手術切除、放射治療和化學治療等，其中化學治療(即化療)是治療腫瘤及免疫性疾病的主要手段，已有一百多種化療藥物被美國食品藥品管理局(FDA)批準臨床使用。由于大部分抗腫瘤藥物的水溶性和穩定性較差，造成藥物的生物利用度低，出現給藥困難，毛細管栓塞，患者個體差異顯著及全身有效治療藥物濃度難以維持等問題。另外，幾乎所有高效抗癌藥物都具有較大的毒性，對腫瘤與正常組織缺乏選擇性，且易于同時滲入腫瘤和健康細胞，從而對人體產生較大的副作用。為了解決在化療藥物方面存在的問題，使用藥物傳遞系統是最有效的途徑。基于此，設計一種高效的抗腫瘤藥物傳輸體系，能夠為藥物提供增溶和保護作用，減小藥物有效劑量和毒副作用，將藥物輸送到靶向腫瘤組織，實現高效的細胞內傳遞，藥物控制釋放與有效治療，且不會影響正常細胞，這種藥物傳輸體系(即藥物載體)對于腫瘤治療具有極其重要的意義。

為了有效地治療腫瘤，科研工作者進行了大量的科學研究，并取得了一系列研究進展，尤其是在多功能藥物載體方面成果顯著。多功能藥物載體是指通過巧妙設計，在單一且穩定的體系中整合多個功能材料，以達到特定目的，如延長血液循環時間、靶向作用、生理敏感性、藥物控制釋放、負載治療劑、顯像劑或造影劑等。多功能藥物載體可作為多種藥物傳遞的有效平臺，通過識別靶向細胞獨特的表面信號與藥物有序可控的釋放，使藥物發揮協同增效作用，并顯著降低藥物的毒副作用，這對腫瘤治療具有獨特的優勢。

近年來，有關多功能藥物載體的研究報道呈現日益增多的趨勢，特別是具有靶向或示蹤功能的藥物載體，在生物醫藥領域的應用價值異常顯著。本發明旨在設計一種具有熒光示蹤功能，且具有熱及pH敏感的藥物控制釋放行為和生物相容性的抗癌藥物載體。選擇羧甲基殼聚糖微球為主要載體，接枝了聚(N-異丙基丙烯酰胺)，包封了量子點負載的多孔硅納米粒，形成一種新型的多功能藥物載體。該載體可負載抗癌藥物(如阿霉素)并在特定的溫度和pH下有序釋放，可實現腫瘤的靶向和控制給藥，以及原位示蹤或成像的治療目的。

經檢索國內外專利文獻，廣泛查閱國內外公開出版物，迄今為止，尚未見與本發明完全相同的技術方法。另外，本發明在治療腫瘤中的有益效果，使得本發明具有廣泛的實用性。

發明內容

本發明的目的就是為了克服上述現有技術存在的缺陷而提供一種設計合理、工藝可行、反應易控制的熒光及熱/pH敏感的有機-無機復合微球載體的制備方法。

本發明的目的可以通過以下技術方案來實現：熒光及熱/pH敏感的有機-無機復合微球載體的制備方法，其特征在于，該方法具體包括以下步驟：

(1)在N₂保護，磁力攪拌及堿性水溶液中，碲粉與硼氫化鈉反應，制備出碲氫化鈉前驅體，然后加入到溶有氯化鎘與巰基丙酸的混合水溶液中，在堿性條件下反應，制備出碲化鎘量子點；

(2)將碲化鎘量子點分散在含有氯仿與表面活性劑(I)的水中，然后旋轉蒸發除去氯仿和水，得到表面活性劑(I)穩定的量子點，然后加入含有氫氧化鈉、乙酸乙酯及烷基硅(I)的水溶液中，在一定反應溫度和磁力攪拌下反應，結束后進行離心，用乙醇/水混合溶劑洗滌；

(3)將步驟(2)所得樣品加入溶有烷基硅(II)的乙醇中，在一定反應溫度和磁力攪拌下反應，然后加入硝酸銨繼續反應一段時間，產物進行離心，用乙醇/水混合溶劑洗滌，得到負載了量子點的多孔硅納米粒；

(4)向溶有N-異丙基丙烯酰胺，羧甲基殼聚糖與交聯劑的水溶液中加入步驟(3)制得的多孔硅納米粒，在一定溫度和N₂保護下磁力攪拌反應，再加入引發劑和表面活性劑(II)繼續反應，結束后產物進行離心、滲析，得到目標產物；

(5)將阿霉素水溶液加入滲析后的目標產物中孵化，然后滲析以去除未載入的阿霉素，用磷酸緩沖溶液調節至不同pH值，用紫外分光光度法測定阿霉素在不同溫度下的釋放曲線。

步驟(1)所述的堿性水溶液是指氫氧化鈉水溶液，pH值為9～11；所述的碲粉與硼氫化鈉按摩爾濃度比(1∶4)進行反應制得碲氫化鈉前驅體。

步驟(1)所述的碲氫化納、氯化鎘與巰基乙酸摩爾濃度比為1∶5∶8～1∶10∶15，反應溫度為60～90℃，體系pH為9～11。