[發明專利]一種放線菌纖溶酶及其制備方法

無效

• 申請號: 201310156073.5
• 申請日: 2013-05-02
• 公開（公告）號: CN103333874A
• 公開（公告）日: 2013-10-02
• 發明（設計）人: 鄧永平;劉曉蘭;鄭喜群;艾瑞波
• 申請（專利權）人: 齊齊哈爾大學
• 主分類號: C12N9/68
• 分類號: C12N9/68;C12R1/01
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種放線菌纖溶酶，該放線菌纖溶酶以保藏號為CGMCC?No.5816，分類學命名為放線菌Actinomycete?sp.的放線菌菌株YY21為培養菌種，經發酵、分離和提純制成；經過Q-TOF2串聯質譜測得其中五個肽段的氨基酸序列分別為：A-Q-S-V-P-Y-G-L-S-Q-L-K，其分子量為1289.6644；V-A-V-L-D-S-G-L-D-S-S-H-P-D-L-K，其分子量為1651.8243；N-S-L-E-S-T-A-T-N-L-G-N-P-A-G-A-T-Y-G-K，其分子量為1964.8844；h-p-n-w-T-n-t-n-v-r，其分子量為1237.5844；Y-P-S-V-L-A-V-G-A-V-D-N-G-V-S-N-K，其分子量為1688.8043。

2.一種如權利要求1所述放線菌纖溶酶的制備方法，是以微生物放線菌菌株YY21為菌種，經發酵培養產生纖溶酶，將發酵物濾去菌體和固形物，收集濾過液，用30％-60%W/V飽和度硫酸銨鹽析，得到粗酶液，所述的粗酶液經如下純化步驟依次進行純化：

a、Octyl-Sepharose?FF疏水相互作用層析，將樣品鹽飽和度調到30％，上樣后用30～0％W/V硫酸銨溶液梯度洗脫，收集有纖溶活性組分；和

b、Phenyl-Sepharose?HP疏水相互作用層析，將樣品鹽飽和度調到15％，上樣后用15～0％W/V硫酸銨溶液梯度洗脫，收集有纖溶活性組分。