[發明專利]綿羊FGF5基因定點敲除系統及其應用無效
| 申請號： | 201310155501.2 | 申請日： | 2013-04-28 |
| 公開（公告）號： | CN103289974A | 公開（公告）日： | 2013-09-11 |
| 發明（設計）人： | 皮文輝;周平;楊華;楊永林;甘尚權;梁龍;王新華;劉守仁 | 申請（專利權）人： | 新疆農墾科學院 |
| 主分類號： | C12N9/22 | 分類號： | C12N9/22;C12N15/63;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10 |
| 代理公司： | 北京鼎佳達知識產權代理事務所(普通合伙) 11348 | 代理人： | 王偉鋒;劉鐵生 |
| 地址： | 832000 新疆維*** | 國省代碼： | 新疆;65 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 綿羊 fgf5 基因 定點 系統 及其 應用 | ||
1.綿羊FGF5基因定點敲除系統，其特征在于，所述定點敲除系統為剪切綿羊FGF5基因靶序列的轉錄激活子樣效應因子核酸酶TALEN；
所述綿羊FGF5基因靶序列如SEQ?ID?NO.1所示核苷酸序列，12-30位核苷酸為識別模塊TALFGF5F、與51-69位核苷酸互補的序列為識別模塊TALFGF5R，31-50位核苷酸為間隔序列；
所述轉錄激活子樣效應因子核酸酶TALEN由剪切所述識別模塊TALFGF5F的核酸酶TALEN-L和剪切所述識別模塊TALFGF5R的核酸酶TALEN-R組成；所述核酸酶TALEN-L為SEQ?ID?NO.2或SEQ?ID?NO.3所示核苷酸編碼的蛋白質，所述核酸酶TALEN-R為SEQ?ID?NO.4或SEQ?ID?NO.5所示核苷酸編碼的蛋白質。
2.權利要求1所述綿羊FGF5基因定點敲除系統的制備方法，其特征在于，包括步驟：
（1）根據綿羊FGF5基因選擇SEQ?ID?NO.1所示核苷酸序列為靶序列，SEQ?ID?NO.1所示核苷酸序列中12-30位核苷酸為識別模塊TALFGF5F、與51-69位核苷酸互補的序列為識別模塊TALFGF5R，31-50位核苷酸為間隔序列；
（2）根據步驟（1）所得識別模塊TALFGF5F和識別模塊TALFGF5R合成剪切所述靶序列的轉錄激活子樣效應因子核酸酶TALEN；所述轉錄激活子樣效應因子核酸酶TALEN由剪切所述識別模塊TALFGF5F的核酸酶TALEN-L和剪切所述識別模塊TALFGF5R的核酸酶TALEN-R組成；
所述核酸酶TALEN-L為SEQ?ID?NO.2或SEQ?ID?NO.3所示核苷酸編碼的蛋白質，所述核酸酶TALEN-R為SEQ?ID?NO.4或SEQ?ID?NO.5所示核苷酸編碼的蛋白質。
3.含有權利要求1所述綿羊FGF5基因定點敲除系統編碼基因的重組表達載體、重組菌或重組細胞系。
4.一種定點敲除綿羊FGF5基因的方法，包括在綿羊成纖維細胞中表達權利要求1所述定點敲除系統的步驟。
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