[發明專利]補腎益壽膠囊指紋圖譜的測定方法

有效

• 申請號: 201310152331.2
• 申請日: 2013-04-27
• 公開（公告）號: CN103257191A
• 公開（公告）日: 2013-08-21
• 發明（設計）人: 秦少容;王欣;羅維早;覃瑤;伍永富;彭濤
• 申請（專利權）人: 太極集團重慶涪陵制藥廠有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/34
• 代理公司: 北京同恒源知識產權代理有限公司 11275
• 代理人: 趙榮之

技術領域

本發明屬于中藥鑒定領域，涉及補腎益壽膠囊指紋圖譜的測定方法。

背景技術

補腎益壽膠囊為中藥復方制劑，由紅參、制何首烏、淫羊藿、丹參、枸杞子、珍珠、靈芝、甘草和黃精共九味藥構成，藥味較多，質量控制難度較大。原質量標準收載于中華人民共和國衛生部藥品標準十四冊，質量標準中分別采用人參皂苷Rb1、Re、Rg1、淫羊藿苷和原兒茶醛為對照品，對其中的紅參、淫羊藿、丹參三味藥材進行了薄層鑒別，但是由于鑒定成分種類少不足以反映該三味藥的質量。并且也未對制何首烏、枸杞子、靈芝、甘草、黃精等其他藥材進行質量監控，不足以對產品質量進行有效控制。

因此建立一種綜合的、宏觀的、可量化的鑒別和測定有效成分含量的方法是鑒定中藥復方制劑的發展方向。中藥指紋圖譜是指某種中藥或某些中藥制劑經適當處理后，采用色譜方法得到能夠標示其化學特征的色譜圖或光譜圖。近年來，很多中藥都進行了指紋圖譜的研究，但對大復方中藥的指紋圖譜研究較少，主要是由于大復方中藥藥味多，藥材質量波動大，成品相似度低。補腎益壽膠囊為我廠獨家品種，為保證產品質量，建立補腎益壽膠囊指紋圖譜對控制產品質量具有重要意義。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的在于提供一種補腎益壽膠囊指紋圖譜的測定方法，解決了現有技術對補腎益壽膠囊質量控制難的問題。

為達到上述目的，本發明提供如下技術方案：

補腎益壽膠囊指紋圖譜的測定方法，包括如下步驟：

a.制備補腎益壽膠囊溶液：準確稱取補腎益壽膠囊內容物，加入溶媒，再進行超聲處理溶解，冷卻后用溶媒補足，然后離心收集上清，得補腎益壽膠囊溶液；所述溶媒為甲醇、乙醇、甲醇水溶液或乙醇水溶液；

b.色譜條件：色譜柱的填料為十八烷基鍵合硅膠，柱溫為25-35℃，流速為0.8-1.2mL，檢測波長為265-275nm，流動相以乙腈與水在體積比為2-100:0-98范圍內梯度洗脫；

c.測定：取步驟a制備的補腎益壽膠囊溶液注入液相色譜儀，按照步驟b的條件進行高效液相色譜測定，得補腎益壽膠囊指紋圖譜。

優選的，所述步驟a是準確稱取補腎益壽膠囊內容物，加入甲醇或體積分數為50%的乙醇，超聲處理15~45分鐘，冷卻后用甲醇或體積分數為50%的乙醇補足，然后在轉速大于10000?r/min條件下離心至少10?min。

優選的，所述步驟a是準確稱取補腎益壽膠囊內容物，加入體積分數為50%的乙醇，超聲處理30分鐘，冷卻后用體積分數為50%的乙醇補足，然后在轉速為10000?r/min條件下離心10?min。

更優選的，所述超聲處理的頻率40?kHz。

優選的，所述步驟b中，色譜條件為：色譜柱的填料為十八烷基鍵合硅膠，柱溫為30℃，流速為1mL，檢測波長為270nm，流動相為乙腈和水，在如下條件下梯度洗脫：

洗脫時間大于等于0分鐘小于20分鐘時，流動相A為2%的乙腈溶液，流動相B為98%水溶液；洗脫時間大于等于20分鐘小于40分鐘時20分鐘時，流動相A為10%的乙腈溶液，流動相B為90%水溶液；洗脫時間大于等于40分鐘小于55分鐘時，流動相A為20%的乙腈溶液，流動相B為80%水溶液；洗脫時間大于等于55分鐘小于80分鐘時，流動相A為25%的乙腈溶液，流動相B為75%水溶液；洗脫時間大于等于80分鐘小于85分鐘時，流動相A為30%的乙腈溶液，流動相B為70%水溶液；洗脫時間大于等于85分鐘小于90分鐘時，流動相A為90%的乙腈溶液，流動相B為10%水溶液；洗脫時間大于等于90分鐘小于92分鐘時，流動相A為90%的乙腈溶液，流動相B為10%水溶液；洗脫時間大于等于92分鐘時，流動相A為2%的乙腈溶液，流動相B為98%水溶液。

優選的，所述步驟c中，注入液相色譜儀的補腎益壽膠囊溶液為15-25μL。

更優選的，所述步驟c中，注入液相色譜儀的補腎益壽膠囊溶液為20μL。