[發明專利]一種以胚芽鞘節作為外植體的玉米再生體系的建立方法

無效

• 申請號: 201310140747.2
• 申請日: 2013-04-22
• 公開（公告）號: CN103190346A
• 公開（公告）日: 2013-07-10
• 發明（設計）人: 萬向元;方才臣;吳鎖偉;肖中華;張丹鳳;劉艷艷;徐媛媛;安學麗;王超
• 申請（專利權）人: 北京金冠豐生物技術有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種以胚芽鞘節為外植體的玉米再生方法，包括以下步驟：

1）將滅菌的玉米種子置于發芽培養基中培養，萌發獲得幼苗；

2）從上述步驟1）中得到的幼苗上切取胚芽鞘節，接種于愈傷組織誘導培養基上誘導愈傷組織并繼代培養；

3）將上述步驟2）中得到的愈傷組織置于胚狀體誘導培養基中，得到玉米愈傷組織胚狀體；

4）將上述步驟3）中得到的愈傷組織胚狀體置于再生培養基中，得到再生苗；

5）將上述步驟4）中得到的再生苗置于生根培養基中，獲得具有3-4條根的玉米再生植株；

上述發芽培養基是MS＋麥芽糖40g/L＋酶水解酪蛋白0.1g/L＋谷氨酰胺0.5g/L＋2-嗎啉乙磺酸2g/L＋MgCl₂·6H2O?1.6g/L＋抗壞血酸?0.1g/L＋6-BA?3mg/L＋毒莠定0.01g/L；

愈傷誘導培養基是MS＋蔗糖?30g/L＋維生素B₁0.5mg/L＋酶水解酪蛋白?0.5g/L＋脯氨酸?1.5g/L＋硝酸銀?5mg/L＋2,4-D?1.5-5mg/L＋毒莠定?0-0.001mg/L；

胚狀體誘導培養基是MS＋蔗糖?30g/L＋脯氨酸?0.7g/L＋6-BA?2mg/L；

再生培養基是MS＋蔗糖?20g/L＋肌醇?0.1g/L。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于步驟2）中所述的胚芽鞘節是指幼苗凸起的頂端分生組織。

3.如權利要求2所述的方法，其特征在于步驟2）中所述的繼代培養是將所獲得的愈傷組織在愈傷組織誘導培養基上培養增殖，得到增殖的愈傷組織。

4.如權利要求3所述的方法，其特征在于步驟6）獲得的再生植株需進行煉苗后再移栽到土壤中。