[發明專利]實時熒光PCR中目的基因的表達量的校正方法

有效

• 申請號: 201310121958.1
• 申請日: 2013-03-26
• 公開（公告）號: CN103173559A
• 公開（公告）日: 2013-06-26
• 發明（設計）人: 朱礪;張順華;朱康平;李雪梅;李學杰;陳晨;洪蜜;袁紅敏;張宇;熊勇
• 申請（專利權）人: 四川農業大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;G01N21/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.實時熒光PCR中目的基因的表達量的校正方法，其特征在于包括如下步驟：

1)按照設定的體積比a：b將反轉錄產物的試驗樣品和參照模板混合作為模板cDNA進行熒光定量PCR反應，并針對每一個不同的樣本分別重復以上步驟得到Ct_{(1。。。。n)}；

2)在進行實時熒光定量PCR反應時增加以參照模板為樣本的反應孔，體積總量與步驟(1)相同，得到Ct₀；

3)按照2^-ΔCT法、2^-ΔΔCT法或者Pfaffl法得到基因的相對表達量；

4)根據步驟1)的混合比例得到方程一：ax+by＝2^(-Ct_n)，根據步驟2)得到方程二：(a+b)y＝2^(-Ct₀)，聯解方程組可以得到各個樣本看家基因的相對表達量x；

5)以根據方程組聯解得到的看家基因相對表達量來對目的基因表達量進行校正。

2.根據權利要求1所述的校正方法，其特征在于所述的2^-ΔΔCT法法是指根據熒光定量所得Ct值，進行2^(-Ct)將Ct值轉化為線性關系，計算得到基因相對表達量的方法。

3.根據權利要求1所述的校正方法，其特征在于所述的2^-ΔCT法是指根據熒光定量所得Ct值，進行2^(-Ct)將Ct值轉化為線性關系，計算得到基因相對表達量的方法。

4.根據權利要求1所述的校正方法，其特征在于所述的Pfaffl法是指用于相對定量熒光定量PCR的數據處理方法。