[發明專利]萊克多巴胺、西馬特羅二聯膠體金試紙條及其制備方法與用途

無效

• 申請號: 201310121479.X
• 申請日: 2013-04-09
• 公開（公告）號: CN103235125A
• 公開（公告）日: 2013-08-07
• 發明（設計）人: 賴衛華;彭濤;楊萬春;陳媛;劉文娟
• 申請（專利權）人: 江西中德生物工程有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/531
• 代理公司: 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201
• 代理人: 李志東

技術領域

本發明屬于食品安全領域中涉及β₂-受體激動劑殘留檢測領域。具體而言，本發明涉及萊克多巴胺、西馬特羅二聯膠體金試紙條及其制備方法與用途。?

背景技術

萊克多巴胺(Ractopamine)、西馬特羅(Cimaterol)都屬于β₂-受體激動劑，近年來，很多不法商家將它們作為鹽酸克倫特羅的替代品添加于動物飼料中，當長期用來飼喂動物時，萊克多巴胺、西馬特羅對動物有營養再分配的作用，促進動物體內蛋白質沉積而抑制脂肪形成，從而顯著提高動物胴體的瘦肉率。但萊克多巴胺、西馬特羅在體內代謝緩慢、易聚積、藥物殘留率高，當人類食用殘留該類藥物的動物性食品后會產生中毒從而對人體健康產生相當的危害，通常表現為肌肉震顫、心悸、發燒、惡心嘔吐等，嚴重的會昏迷甚至死亡。因此，許多國家已經禁止在動物飼料中添加β₂-興奮劑，但是關于β₂-興奮劑的食品安全事件時有發生。?

目前，國內外檢測萊克多巴胺和西馬特羅的方法主要有高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜質譜聯用技術(GC-MS)、液相色譜質譜聯用技術(LC-MS)、酶聯免疫吸附法(ELISA)。在食品安全檢測中，往往先用ELISA進行初篩后，再對陽性樣本用HPLC或GC-MS、LC-MS進行確證。但是上述方法所用的儀器設備昂貴復雜、成本高，同時需要對操作人員進行特殊培訓，且實驗結果不能立即顯示，因此不適用于商檢、防疫、畜牧生產者對懷疑對象的快速在線檢測和監控。?

膠體金試紙條是以膠體金作為免疫層析的指示物，其原理是以條狀纖維層析材料為固相，通過毛細作用使樣品溶液在層析條上泳動，并同時使樣品中的待測物與層析材料上針對待測物的受體(如抗體或抗原)發生高特異高親和性的免疫反應，層析過程中免疫復合物被富集或截留在層析材料的一定區域（檢測帶），通過直接運用可目測的膠體金標記物而得到直觀的實驗結果。雖然該方法快速方便，但是膠體金試紙條仍有以下缺點：?

(1)只有當金顆粒集聚到一定量(10⁷個/mm²)時，才出現肉眼可見的紫紅條帶，且該顏色條帶與背景對比度不大，從而限制了檢測靈敏度。?

(2)樣品基質效應明顯，背景干擾大。?

(3)無法實現定量檢測。?

(4)只能檢測單個污染物?

此外，雖然現在也有單獨檢測萊克多巴胺的膠體金試紙條和西馬特羅的檢測卡，但是至今仍沒有一種能同時定性且定量檢測萊克多巴胺和西馬特羅的產品。?

因此，目前對于同時定量檢測萊克多巴胺與西馬特羅的檢測手段仍有待改進。?

發明內容

本發明旨在至少在一定程度上解決上述技術問題之一。為此，本發明的一個目的在于提出一種能有效檢測萊克多巴胺和西馬特羅的二聯膠體金試紙條及其制備方法和用途。?

在本發明的第一方面，參考圖1，本發明提出了一種萊克多巴胺、西馬特羅二聯膠體金試紙條，包括：?

底板，所述底板具有第一端和第二端，并且沿所述第一端向第二端的方向，所述底板上依次形成有濾紙、樣品墊、金標墊、硝酸纖維素膜和吸水墊，?

其中，所述金標墊上是含有膠體金標記的抗萊克多巴胺單克隆抗體和膠體金標記的西馬特羅單克隆抗體，?

所述硝酸纖維素膜上進一步形成有兩條檢測線和一條質控線，?

所述檢測線依次由能與抗萊克多巴胺單克隆抗體結合的萊克多巴胺檢測抗原線狀點樣和能與抗西馬特羅單克隆抗體結合的西馬特羅檢測抗原線狀點樣組成，?

所述質控線由能與抗萊克多巴胺單克隆抗體結合和抗西馬特羅單克隆抗體結合的驢抗小白鼠抗體線狀點樣組成。由此，可以有效地獲得萊克多巴胺、西馬特羅二聯膠體金試紙條，從而對樣品中萊克多巴胺、西馬特羅進行定量檢測。?

在本發明的又一方面，本發明提出了一種制備前面所述的萊克多巴胺、西馬特羅二聯膠體金試紙條的方法，其包括下列步驟：?

制備硝酸纖維素膜，所述硝酸纖維素膜上形成有兩條檢測線和一條質控線；?

制備金標墊；以及?

組裝試紙條，?

其中，?

用能與抗萊克多巴胺單克隆抗體結合的萊克多巴胺檢測抗原和能與抗西馬特羅單克隆抗體結合的西馬特羅檢測抗原在所述硝酸纖維素膜上進行線狀點樣分別作為所述兩條檢測線；?

用能與抗萊克多巴胺單克隆抗體結合和能與抗西馬特羅單克隆抗體結合的驢抗小白鼠抗體在所述硝酸纖維素膜上進行線狀點樣作為質控線。?