[發明專利]基于基因工程策略優化耶氏解脂酵母重組菌合成共軛亞油酸

有效

• 申請號: 201310120175.1
• 申請日: 2013-04-09
• 公開（公告）號: CN103233036A
• 公開（公告）日: 2013-08-07
• 發明（設計）人: 陳衛;張灝;張白曦;李敏;宋元達;陳海琴;趙建新;陳永泉;顧震南
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12N15/81
• 分類號: C12N15/81;C12N1/19;C12P7/64;C12R1/645
• 代理公司: 北京君智知識產權代理事務所 11305
• 代理人: 田燕

1.含有opai/d12共表達基因的重組表達質粒。?

2.根據權利要求1所述的重組表達質粒，其特征在于該質粒為pJU16-opai-d12。?

3.含有權利要求1或2所述的重組表達質粒的宿主細胞。?

4.根據權利要求3所述的宿主細胞，其特征在于所述宿主細胞是耶氏解脂酵母菌。?

5.根據權利要求4所述的宿主細胞，其特征在于所述耶氏解脂酵母菌是CCFM-JUL菌，該菌株已于2013年1月28日保藏于北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，菌種保藏中心的保藏編號為CGMCCNo.7222。?

6.根據權利要求5所述的宿主細胞，其特征在于所述耶氏解脂酵母菌是CCFM-JU277-9，該菌株已于2013年3月06日保藏于北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，菌種保藏中心的保藏編號為CGMCCNo.7284。?

7.權利要求1-2任一項所述的重組表達質粒或權利要求3-6任一項所述的宿主細胞在生產共軛亞油酸中的用途，其特征在于所述的共軛亞油酸是t10，c12-CLA。?

8.利用權利要求3-6任一項所述的宿主細胞生產共軛亞油酸的方法，其特征在于包括發酵培養所述宿主細胞。?

9.根據權利要求8所述的生產共軛亞油酸的方法，其特征在于在大豆油培養基中發酵生產，具體發酵培養條件如下：CCFM-JU277-9菌株活化后，將種子液按5%接種量轉接至5LYN₂₀BDS培養基中，28℃發酵，發酵時間為30-45小時。?

10.根據權利要求9所述的生產共軛亞油酸的方法，其特征在于具體發酵培養條件如下：CCFM-JU277-9菌株活化后，將種子液按5%接種量轉接至5LYN₂₀BDS培養基中，28℃發酵，發酵時間為40小時。?