[發明專利]一種灰楸的組織培養方法

有效

• 申請號: 201310109903.9
• 申請日: 2013-03-29
• 公開（公告）號: CN103190344A
• 公開（公告）日: 2013-07-10
• 發明（設計）人: 王軍輝
• 申請（專利權）人: 中國林業科學研究院林業研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王朋飛;張慶敏

技術領域

本發明涉及一種木本植物的組織培養方法，尤其是涉及一種灰楸的組織培養方法。

背景技術

灰楸（Catalpa?fargesii）為紫葳科（Bignoniaceae）梓樹屬（Catalpa）高大落葉喬木，是我國傳統栽培的優質珍貴用材及園林觀賞樹種。其分布范圍廣，主要分布于我國中西部地區，以渭河、涇河、汾河流域及秦嶺山地為集中區，散生于村莊周邊及山谷中。灰楸根系發達，生長速度快，抗風、固土能力強，耐寒耐旱，材質紋理通直、堅韌致密，是優質速生用材樹種。

通常，灰楸通過嫁接和扦插來繁殖。嫁接繁殖需提前1年培育砧木（梓樹），翌年采集母本1年生枝條或苗干上的芽作為接穗；嫁接過程中，由于接穗直徑生長一般大于砧木，導致接口愈合較差，成活率一般在70%左右，嫁接苗抗風性較弱，且砧木基部多萌芽，需不斷抹芽，增加了管理成本。扦插繁殖需采集當年生枝條、苗干或根進行埋干（根）催芽，采集半木質化嫩枝進行扦插，對催芽床和扦插床溫、濕度及空氣相對濕度要求較為嚴格，管理成本高，扦插成活率較低，一般為50%左右。

組織培養是一種高效的無性繁殖方式，繁殖效率高且成本較低，是解決灰楸優良無性系快繁的有效手段，目前尚未見有關灰楸優良無性系組織培養方面的報道。

發明內容

為了克服嫁接和扦插等無性繁殖技術存在的不足，本發明的目的在于提供一種灰楸的組織培養方法，該方法可以高效地獲得優質的灰楸組培苗。

本發明提供的灰楸組織培養方法，包括：采集灰楸母樹一年生萌生枝條依次進行枝條水培催芽、無菌化處理、芽的誘導和增殖、不定芽生根培養、煉苗與移栽，得到灰楸組培苗。

所述枝條水培催芽包括：采集灰楸母樹一年生萌生枝條，在室內水培（自來水）催芽后，摘取萌發芽。最好待萌發芽長度為10cm左右，最優選8～12cm時摘取。

所述無菌化處理包括：將水培催芽后的萌發芽用自來水沖洗30min，之后用質量濃度為10%的次氯酸鈉溶液浸泡6～7min，之后再經無菌水沖洗4～5次，最后用無菌濾紙吸干表面水分。

所述芽的誘導和增殖包括：將無菌化處理過的萌發芽截成莖段，然后接種于誘導培養基上，培養35～50天，得到分化芽；然后再將該分化芽截成莖段接種于增殖培養基上，培養30～45天后形成不定芽。

優選地，無菌化處理過的萌發芽截成的莖段，以及分化芽截成的莖段上至少有一個腋芽。

更優選地，所述芽的誘導和增殖包括：將無菌化處理過的萌發芽截成長度為1.5cm左右，最優選1.4～1.6cm的莖段，然后接種于誘導培養基上，培養35～50天，得到分化芽；然后再將該分化芽截成長度為1.0cm左右，最優選0.8～1.2cm的莖段接種于增殖培養基上，培養30～45天后形成不定芽。

其中，所述芽的誘導分化和增殖培養所用培養基為DKW基本培養基，還包括：0.6～1.4mg·L^-16-BA（6-芐基氨基嘌呤，benzylaminmopurine），0.1～0.3mg·L^-1IBA（吲哚丁酸，Indole-3-Butytric?acid），25g·L^-1蔗糖和4.5g·L^-1瓊脂。優選為：DKW基本培養基，0.75～1.2mg·L^-16-BA，0.13～0.23mg·L^-1IBA，25g·L^-1蔗糖和4.5g·L^-1瓊脂。

進一步地，所述芽的誘導分化和增殖培養基的pH為5.8。

進一步地，芽的誘導分化過程中，培養3天后，莖段腋芽處芽開始膨大；8～10天莖段基部愈傷組織開始膨大；共誘導培養35～50天（優選40～48天）分化芽的芽長大于0.7cm。

進一步地，將該分化芽截成莖段接種于增殖培養基上，培養8～10天后開始增殖分化形成不定芽，30～45天（優選34～40天）后不定芽可以長到1.0cm以上。

所述不定芽生根培養包括：將增殖得到的不定芽截成莖段，轉接入生根培養基中誘導生根，28～40天后長成生根苗。