[發明專利]一種灰楸的組織培養方法

有效

• 申請號: 201310109903.9
• 申請日: 2013-03-29
• 公開（公告）號: CN103190344A
• 公開（公告）日: 2013-07-10
• 發明（設計）人: 王軍輝
• 申請（專利權）人: 中國林業科學研究院林業研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王朋飛;張慶敏

1.一種灰楸組織培養方法，包括：采集灰楸母樹一年生萌生枝條依次進行枝條水培催芽、無菌化處理、芽的誘導和增殖、不定芽生根培養、煉苗與移栽，得到灰楸組培苗。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述枝條水培催芽包括：采集灰楸母樹一年生萌生枝條，在室內水培催芽后，摘取萌發芽。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述無菌化處理包括：將水培催芽后的萌發芽用自來水沖洗30min，之后用質量濃度為10%的次氯酸鈉溶液浸泡6～7min，之后再經無菌水沖洗4～5次，最后用無菌濾紙吸干表面水分。

4.根據權利要求1～3任意一項所述的方法，其特征在于，所述芽的誘導分化和增殖包括：將無菌化處理過的萌發芽截成莖段，然后接種于誘導培養基上，培養35～50天，得到分化芽；然后再將該分化芽截成莖段接種于增殖培養基上，培養30～45天后形成不定芽。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述芽的誘導和增殖培養所用培養基為DKW基本培養基，還包括：0.6～1.4mg·L^-16-BA，0.1～0.3mg·L^-1IBA，25g·L^-1蔗糖和4.5g·L^-1瓊脂；優選為：DKW基本培養基，還包括：0.75～1.2mg·L^-16-BA，0.13～0.23mg·L^-1IBA，25g·L^-1蔗糖和4.5g·L^-1瓊脂；所述芽的誘導分化和增殖培養基的pH為5.8。

6.根據權利要求1～5任意一項所述的方法，其特征在于，所述不定芽生根培養包括：將增殖分化得到的不定芽截成莖段，轉接入生根培養基中誘導生根，28～40天后長成生根苗。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述不定芽生根培養所用的培養基為1/2MS基本培養基，還包括：0.25～0.35mg·L^-1IBA，0.025～0.035mg·L^-1NAA，10g·L^-1蔗糖和5.0g·L^-1瓊脂；優選為：1/2MS基本培養基，還包括：0.28～0.32mg·L^-1IBA，0.029～0.032mg·L^-1NAA，10g·L^-1蔗糖和5.0g·L^-1瓊脂；所述不定芽生根培養基的pH為5.8。

8.根據權利要求1～7任意一項所述的方法，其特征在于，所述煉苗與移栽包括：將不定芽生根培養出的生根苗置于溫室中煉苗后移栽，移栽后遮陰；生根苗移栽的基質為泥炭土：珍珠巖=3～5:1，優選4:1。

9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，生根苗移栽的基質還可包含多菌靈，用量為200g/m³。

10.根據權利要求4～9任意一項所述的方法，其特征在于，所述的芽的誘導分化和增殖、不定芽生根培養的溫度均為22～26℃，光照強度均為1800～2200勒克斯，光照時間均為12～15小時/每天。