[發(fā)明專利]一種測(cè)定茶多酚硬脂酸酯含量的方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310109622.3
• 申請(qǐng)日: 2013-03-29
• 公開（公告）號(hào): CN103234932A
• 公開（公告）日: 2013-08-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張濤;田永強(qiáng);陸茜;艾永循;徐德
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江漢大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N21/33
• 分類號(hào): G01N21/33
• 代理公司: 北京三高永信知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11138
• 代理人: 徐立

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及化學(xué)定量檢測(cè)領(lǐng)域，特別涉及一種測(cè)定茶多酚硬脂酸酯含量的方法。

背景技術(shù)

茶多酚（Green?Tea?Polyphenols，GTP）是一種性能十分優(yōu)異的純天然抗氧化劑，無毒副作用，具抑制細(xì)菌、抗氧化等性能，但茶多酚易溶于水而難溶于脂，因而直接將其用于抗油脂及高脂食品的氧化變質(zhì)便受到很大限制，茶多酚硬脂酸酯是茶多酚的硬脂酸氧酰化產(chǎn)物，是脂溶性茶多酚的一種，與茶多酚一樣，茶多酚硬脂酸酯同樣具有抗氧化等廣泛的藥理作用，且各組分具有較強(qiáng)的協(xié)同作用。

現(xiàn)有技術(shù)中有一種在植物油中檢測(cè)微量脂溶性茶多酚的方法，該方法首先以沒食子酸乙酯為標(biāo)準(zhǔn)品，采用酒石酸亞鐵比色法，以亞鐵離子為顯色劑，通過茶多酚類能與亞鐵離子形成紫藍(lán)色絡(luò)合物，測(cè)定脂溶性茶多酚的含量，然后用已知含量的脂溶性茶多酚作為對(duì)照品，采用福林酚試劑氧化法，測(cè)定植物油中微量脂溶性茶多酚的含量。

在實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的過程中，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)現(xiàn)有技術(shù)至少存在以下問題：

相對(duì)于茶多酚的理化性質(zhì)，脂溶性茶多酚在組成、結(jié)構(gòu)、平均分子量、分子中鄰二酚羥基或連三酚羥基的數(shù)量和與亞鐵離子顯色的強(qiáng)度等均發(fā)生了較大的變化，在這種情況下，上述方法仍然采用沒食子酸乙酯與表沒食子兒茶素沒食子酸酯在相同質(zhì)量下與亞鐵離子顯色物吸光度的比值1.5，而且，上述方法是通過測(cè)定酚羥基的含量間接反映脂溶性茶多酚的含量，導(dǎo)致其測(cè)定結(jié)果偏低，不能直接得到脂溶性茶多酚的含量，而且該方法較為繁瑣，只適用于微量脂溶性茶多酚的檢測(cè)。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決現(xiàn)有技術(shù)中不能準(zhǔn)確測(cè)定脂溶性茶多酚的含量的問題，本發(fā)明實(shí)施例提供了一種測(cè)定茶多酚硬脂酸酯含量的方法。所述技術(shù)方案如下：

本發(fā)明提供了一種測(cè)定茶多酚硬脂酸酯含量的方法，所述方法包括以下步驟：

將對(duì)照品和供試品分別制備成對(duì)照品溶液和供試品溶液，所述對(duì)照品為茶多酚硬脂酸酯；

通過分別繪制所述對(duì)照品溶液和所述供試品溶液的紫外波長掃描圖，獲得所述對(duì)照品溶液和所述供試品溶液的最大吸收波長，并根據(jù)所述最大吸收波長確定檢測(cè)波長；

繪制所述對(duì)照品溶液的標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算所述標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程；

采用紫外分光光度法測(cè)定所述供試品溶液的吸光度；

將所述吸光度帶入所述標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程計(jì)算所述供試品中茶多酚硬脂酸酯的含量。

具體地，所述供試品為茶多酚硬脂酸酯或含有所述茶多酚硬脂酸酯的制劑，所述供試品溶液的溶劑為有機(jī)溶劑。

具體地，通過所述供試品溶液的紫外波長掃描圖確定所述供試品溶液的最大吸收波長的方法為：所述供試品為所述茶多酚硬脂酸酯時(shí)，將所述茶多酚硬脂酸酯配制成每毫升含有所述茶多酚硬脂酸酯為0.04mg的所述供試品溶液，以所述有機(jī)溶劑為參比，在200-400nm波長范圍內(nèi)掃描，得到所述供試品溶液的紫外波長掃描圖，由所述紫外波長掃描圖確定所述供試品溶液的最大吸收波長為275nm。

具體地，通過所述供試品溶液的紫外波長掃描圖確定所述供試品溶液的最大吸收波長的方法為：所述供試品為所述含有茶多酚硬脂酸酯的制劑時(shí)，取所述制劑適量，精密稱定，置于容器中，加適量所述有機(jī)溶劑，充分?jǐn)嚢瑁陔x心機(jī)3600rpm離心30min，分取上清液，并重復(fù)提取3次，合并所述上清液并過濾，將濾液移入容量瓶，用所述有機(jī)溶劑定容，配制成每毫升含有所述茶多酚硬脂酸酯為0.04mg的所述供試品溶液，以制備所述供試品溶液的方法制備等質(zhì)量空白制劑提取液作為參比，在200-400nm波長范圍內(nèi)掃描，得到所述供試品溶液的紫外波長掃描圖，由所述紫外波長掃描圖確定所述供試品溶液的最大吸收波長為275nm。

具體地，所述對(duì)照品溶液的溶劑為所述有機(jī)溶劑。

具體地，通過所述對(duì)照品溶液的紫外波長掃描圖確定所述對(duì)照品溶液的最大吸收波長的方法為：取所述茶多酚硬脂酸酯，用所述有機(jī)溶劑溶解，配制成每毫升含有所述茶多酚硬脂酸酯為0.04mg的所述對(duì)照品溶液，以所述有機(jī)溶劑為參比，在200-400nm波長范圍內(nèi)掃描，得到所述對(duì)照品溶液的紫外波長掃描圖，由所述紫外波長掃描圖確定所述對(duì)照品溶液的最大吸收波長為275nm。

具體地，根據(jù)所述對(duì)照品溶液與所述供試品溶液的最大吸收波長均為275nm，確定所述檢測(cè)波長為275nm誤差為±2nm。