[發明專利]多價肺炎球菌莢膜多糖-蛋白質共軛組合物及其制備方法

無效

• 申請號: 201310109045.8
• 申請日: 2013-03-29
• 公開（公告）號: CN104069488A
• 公開（公告）日: 2014-10-01
• 發明（設計）人: 高強;董珊珊;王新立;蔡芳;戈小琴;尹衛東
• 申請（專利權）人: 北京科興中維生物技術有限公司
• 主分類號: A61K39/09
• 分類號: A61K39/09;A61K47/48;C08B37/00;A61P31/04
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王朋飛;張慶敏

1.多價肺炎球菌莢膜多糖-蛋白質共軛組合物，其特征在于，其是包括14種不同血清型肺炎鏈球菌（Streptococcus?pneumoniae）莢膜多糖和載體蛋白質共價連接形成的共軛組合物；其中，所述14種不同血清型包括1、4、5、6A、6B、7F、9V、14、18C、19A、19F、22F、23F和33F。

2.根據權利要求1所述的共軛組合物，其特征在于，其是由14種不同血清型肺炎鏈球菌莢膜多糖和載體蛋白質共價連接形成的共軛組合物；其中，所述14種不同血清型為1、4、5、6A、6B、7F、9V、14、18C、19A、19F、22F、23F和33F。

3.根據權利要求1所述的共軛組合物，其特征在于，莢膜多糖與載體蛋白質的重量比為1:2-2:1，各血清型莢膜多糖的質量為血清型1：血清型4：血清型5：血清型6A：血清型7F：血清型9V：血清型14：血清型18C：血清型19A：血清型19F：血清型22F：血清型23F：血清型33F：血清型6B=1:1:1:1:1:1:1:1:1:1:1:1:1:2。

4.根據權利要求1所述的共軛組合物，其特征在于，所述載體蛋白質為白喉類毒素或破傷風類毒素。

5.根據權利要求4所述的共軛組合物，其特征在于，所述載體蛋白質為白喉類毒素CRM197。

6.制備權利要求1-5任一項所述共軛組合物的方法，其特征在于，分別對14種不同血清型肺炎鏈球菌的莢膜多糖進行分離純化，然后將各血清型莢膜多糖分別與載體蛋白質進行共價連接，形成單價共軛物，最后將各型單價共軛物混合，即得多價肺炎球菌莢膜多糖-蛋白質共軛組合物。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，肺炎鏈球菌莢膜多糖分離純化的步驟為：

1）建立肺炎球菌菌種庫，采用工作種子進行肺炎球菌發酵；

2）向肺炎球菌發酵液中加入適量的去氧膽酸鈉進行殺菌并剝離肺炎莢膜多糖；

3）對殺菌后的發酵液進行離心，去除菌體，收集離心上清，然后進行超濾濃縮；

4）向濃縮液中加入無水乙醇，使乙醇終濃度為25%～45%，攪拌后離心去除核酸；

5）向上清中加入乙醇使其終濃度達到55%～80%，攪拌后，離心，去除上清收集沉淀；

6）加水溶解沉淀，加入1-3倍溶液體積的苯酚進行抽提，去除蛋白；

7）向上清中加入乙醇，使其終濃度達到55%～80%，離心后收集沉淀，即得純化的肺炎球菌莢膜多糖。

8.權利要求1-5任一項所述共軛組合物在制備用于預防或治療肺炎鏈球菌所致疾病的藥物中的應用。

9.多價肺炎球菌莢膜多糖結合疫苗，其含有權利要求1-5任一項所述的共軛組合物，以及賦形劑和/或任選基于鋁的佐劑；其中，基于鋁的佐劑其終濃度為0.25-1.0mg/mL。

10.根據權利要求9所述的結合疫苗，其特征在于，其為噴霧劑、注射劑、凍干劑、膠囊劑、片劑或丸劑。