[發明專利]一種用HPLC法測定卡巴他賽有關物質的方法

有效

• 申請號: 201310108598.1
• 申請日: 2013-03-30
• 公開（公告）號: CN103217493A
• 公開（公告）日: 2013-07-24
• 發明（設計）人: 巴曉雨;郝福;劉軍鋒
• 申請（專利權）人: 神威藥業集團有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及是一種用HPLC法測定卡巴他賽有關物質的方法，尤其是卡巴他賽中間體雜質的測定方法，屬于藥物分析技術領域。

背景技術

卡巴他賽（cabazitaxel）是一種紫杉烷類微管抑制劑，適用于與潑尼松聯用治療既往用含多烯紫杉醇治療方案激素難治轉移性前列腺癌患者。其化學名稱為7,10-雙甲基化多西紫杉醇，分子式為C₄₅H₅₇NO₁₄，化學結構如下：

目前，卡巴他賽是以植物紅豆杉提取物10-去乙酰基-巴卡丁III（簡稱10-DAB，分子式C29H36O10）作為起始原料進行制備，例如：CN1179775A（公開日1998-04-22）先保護7,13位上羥基，再對10位羥基進行甲基化，然后脫除7,13位上的三乙基甲硅基脫保護，對7位羥基甲基化后，與側鏈酸進行耦合，提純后去保護得到卡巴他賽；或者，CN102417491A（公開日2012-04-28）先與側鏈酸進行偶合，再脫去7,10位上兩個保護基（2,2,2-三氯乙氧基羰基），然后通過氫化鈉/碘甲烷對7,10位上的羥基進行甲基化，再開環去保護獲得卡巴他賽；或者，CN102675256A（公開日2012-09-19）先將7,10位羥基用2,2,2-三氯乙氧基氯甲酸酯保護后，與內酰胺側鏈反應，再脫去7,10位上羥基保護基，然后7,10位雙甲基化，最后在酸性條件下水解得到卡巴他賽；等等。關于卡巴他賽的制備方法，均以10-DAB作為起始原料，并需將其7、10、13位羥基部分或全部采用不同的保護基團，如乙氧基乙基（EE）、三甲基硅基、三乙基硅基（TES）、叔丁基二甲硅基（TBDS）、叔丁基二苯基硅基、三氯乙氧基羰基（Troc）進行保護，然后脫保護，所得中間體均具有10-DAB的母核結構。

其中，CN102417491A中，在卡巴他賽合成過程中生成如下4個中間體雜質。

在藥物制備和貯存過程中,對合成方法可能產生的雜質（包括中間體、副產物等有機雜質）進行監測，對于終產品的質量生產過程以及藥品的質量控制非常重要。

本發明首次公開了一種卡巴他賽有關物質的測定方法，采用C18色譜快速準確地測定卡巴他賽及其中間體雜質和起始原料，從而實現了卡巴他賽中間體雜質的控制，保證了卡巴他賽及其制劑的質量可控。

發明內容

本發明的目的是提供一種用HPLC法測定卡巴他賽有關物質的方法，可用于卡巴他賽合成過程和終產品及其制劑的質量控制。

本發明提供了一種用HPLC法測定卡巴他賽有關物質的方法，其選用十八烷基鍵合硅膠色譜柱，以水相-有機相為流動相進行梯度洗脫，檢測波長為220-240nm，其中所述水相選自水，乙酸胺，或濃度為0.01mol/L～0.05mol/L的pH為6.0～7.0的磷酸鹽緩沖溶液中的任意一種或其任意混合物，所述有機相選自甲醇、乙醇或乙腈。

在本發明一些實施方案中，所述磷酸鹽緩沖溶液選自磷酸二氫鉀緩沖溶液、磷酸二氫鈉緩沖溶液、磷酸氫二鉀緩沖溶液或磷酸氫二鈉緩沖溶液，優選磷酸氫二鈉緩沖溶液。在本發明的一些實施方案中，所述磷酸鹽緩沖溶液的濃度優選0.01mol/L～0.03mol/L，更優選0.025mol/L。在本發明的一些實施方案中，所述磷酸鹽緩沖溶液的pH為7.0。

在本發明的一些實施方案中，所述十八烷基鍵合硅膠色譜柱填料的顆粒度為3-5μm，優選5μm。

在本發明的一些實施方案中，所述檢測波長為230nm。

在本發明的一些實施方案中，所述水相-有機相是水-乙腈。

在本發明的一些實施方案中，所述水-乙腈梯度洗脫的體積比為35%-45%：65%-55%（0min），15%：85%（30min），0%-10%：100%-90%（50min），15%：85%（55min）和35%-45%：65%-55%（60min），優選40%：60%（0min），15%：85%（30min），0%：100%（50min），15%：85%（55min）和40%：60%（60min）。

在本發明的一些實施方案中，所述水相-有機相是磷酸氫二鈉緩沖溶液-乙腈，其中磷酸氫二鈉緩沖溶液的pH為7.0、濃度為0.025mol/L。