[發明專利]一種G因子的分離純化方法

無效

• 申請號: 201310107664.3
• 申請日: 2013-03-30
• 公開（公告）號: CN103214566A
• 公開（公告）日: 2013-07-24
• 發明（設計）人: 丁友玲
• 申請（專利權）人: 福州新北生化工業有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K1/22
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種G因子的分離純化方法，其包括從鱟全血中分離提取血細胞步驟及將血細胞崩解后利用親和層析法對鱟血細胞中包括G因子的各種血細胞成分進行初級分離純化的步驟，其特征在于：還包括對初級分離純化所得的主要含G因子的合并組分進一步分離純化的步驟，籍以制備去除凝固原的高純度G因子組分；

該進一步分離純化的步驟為：

第一步：制備ConA-Sepharose瓊脂糖凝膠柱，該ConA-Sepharose瓊脂糖凝膠柱規格為柱為Ф2×16cm，用含有pH=8.0、0.25?mol/L?NaCl的20?mM?Tris-HCl溶液進行預平衡，接著以上述主要含G因子的合并組分作為樣品上樣；

第二步：用0.5?mol/L?NaCl溶液充分沖洗及0.5?mol/L甲基葡萄糖苷methyl-α-D-glucoside溶液洗脫，該0.5?mol/L甲基葡萄糖苷methyl-α-D-glucoside溶液用pH=8.0、20?mM?Tris-HCl?()溶液配制；

第三步：收集第二步產生的洗脫液，用Amicon?PM-10超濾膜濃縮；

第四步：收集第三步產生的濃縮液，用Sephacryl?S-200HR柱進一步提純，該Sephacryl?S-200HR柱為Ф2.7×98cm，用pH?8.0、50mM?Na₃PO₄緩沖液預平衡；

第五步：收集第四步產生的高純度G因子合并組分，用冷凍干燥機低溫濃縮。